GFP蛋白的表达分离与纯化.pptVIP

GFP 表达质粒的转化 （ pGLO → Top 10 ） GFP 的表达（ 阿拉伯糖） GFP 的分离（硫酸铵沉淀法） 疏水相互作用层析 离子交换层系 凝胶过滤层析 SDS检测纯化效果 ? 课堂提问 —— 每人 2-3 个问题；权重： 30% ? 总结报告 —— PPT ， 5 人一组， 10 分钟；权重： 30% ? 实验报告 —— 权重： 40% 要求：标准的论文格式：中、英文标题和摘要；前言； 材料与方法；结果；讨论；参考文献。 PPT ：照片、视频 展示个性，潮！ ? Day 0: 准备实验材料 ? Day 1: GFP 表达质粒的提取； Top 10 感受态细胞 的制备； GFP 表达质粒转化 Top 10 。 ? Day 2: GFP 表达菌株扩大培养； GFP 的诱导表达。 ? Day 3: 表达菌株的收集、破碎；硫酸铵沉淀所用 浓度的确定；硫酸铵沉淀 GFP ；疏水层析。 ? Day 4: 离子交换层析；透析；凝胶过滤层析。 ? Day 5: SDS；染色；脱色，观察结果。 记得带照相机 ！ 鸣谢： 生命学院生物科学 104 班 邹兵 周嘉 赵琅 李运彰 汪源 ? 原核： E.coli