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课题 3 酵母细胞的固定化 葡萄糖异构酶 1．固定化酶的应用实例 —— 生产高果糖浆 (1)反应原理：葡萄糖 ――――――→ 果糖。 (2)生产原理：将葡萄糖异构酶固定在颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装入反应柱中，柱子底端装上分 布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板上的小孔，而反应溶液可以自由出入。 (3)生产操作：①将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入。②使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构 酶接触。③转化成的果糖，从反应柱的下端流出。 (4) 固定化酶的优点：酶既能与反应物接触，又能与产物分离，还可以被反复利用。 2 ． 固定化酶和固定化细胞技术 (1)概念：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。 (2)常用方法 [连线 ] ： (3)载体：包埋法固定化细胞常用的是不溶于水的多孔性载体，如明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素 和聚丙烯酰胺等。 3 ．制备固定化酵母细胞 酵母细 向盛有干酵母的小烧杯中加入蒸馏水 —— 胞的活化 使其由休眠状态恢复正常生活状态 配制 CaCl2 溶液 —— |物质的量浓度为 0.05 mol/L 配制海藻 用酒精灯加热时要边加热边搅拌 —— 酸钠溶液 并且要小火间断加热，反复几次 向冷却至室温的海藻酸钠溶液中加 海藻酸钠溶液与 —— 入已活化的酵母细胞，进行充分搅 酵母细胞混合 拌，使其混合均匀，再转移至注射器中 固定化酵 以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶 —— 母细胞 液滴加到配制好的 CaCl 溶液中，浸泡 左右 2 4 ．用固定化酵母细胞发酵 (1) 操作步骤： 加入到 固定好的酵母细胞 (凝胶珠 )―→用蒸馏水冲洗 2～3 次 ――→ 用于发酵的葡萄糖溶液中。 有气泡产生 (2) 现象 有酒精味散发 5.直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的比较 直接使用酶 固定化酶 固定化细胞 酶的种类 一种或几种 一种 一系列酶 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸 常用载体 无 硅胶、凝胶 纤维素、聚丙烯酰胺 化学结合固定化、物理吸附固 制作方法 无 包埋法固定化 定化 是否需要 否 否 是 营养物质 催化反应 单一或多种 单一 一系列 各种物质 ( 大分 反应底物 各种物质 (大分子、小分子 ) 小分子物质 子、小分子 ) ①既能与反应物接触，又能与 催化效率高、低 优点 产物分离，提高了产品质量 成本更低、操作更容