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测定核酸含量的几种方法 命基111朱家民 核酸 由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，为生命的最基本物质之一。 核酸广泛存在于所有动植物细胞、微生物内、生物体内的核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。 不同的核酸，其化学组成、核苷酸排列顺序等不同。根据化学组成不同，核酸可分为核糖核酸（简称RNA）和脱氧核糖核酸（简称DNA）。 为什么要测核酸含量 有助于接下来核酸相关实验中所用酶和其他试剂含量的确定 为了排除核酸在实验中的干扰 核酸含量测定的几种方法 定磷法 定糖法 紫外吸收法 荧光光度法 定磷法 在酸性环境中，定磷试剂中的钼酸铵以钼酸形式与样品中的磷酸反应生成磷钼酸，当有还原剂存在时磷钼酸立即转变蓝色的还原产物——钼蓝 钼蓝最大的光吸收在650—660nm波长处。当使用抗坏血酸为还原剂时，测定的最适范围为1—10微克无机磷。测定样品核酸总磷量，需先将它用硫酸或过氯酸消化成无机磷再行测定。总磷量减去未消化样品中测得的无机磷量，即得核酸含磷量，由此可以计算出核酸含量。 优缺点：简单，快速，灵敏度高，但是受蛋白质和核苷酸的影响 注意事项 1）清洗实验用容器不要用含磷清洗剂 2）消化过程注意防止爆沸和溅出内容物 定糖法 核酸中的戊糖可在浓盐酸或浓硫酸作用下脱水生成醛类化合物，醛类化合物可与某些成色剂缩合成有色化合物，可用比色法或分光光度法测定其溶液中的吸收值，