葡萄酒中总糖和还原糖的测定精选.pptVIP

实验一 果酒中还原糖和总糖含量的测定 1 一、目的 ? 1 、掌握用直接滴定法测定还原糖的原理和 方法； ? 2 、掌握用酸水解法测定葡萄酒中总糖含量 的原理和方法； ? 3 、了解测定总糖含量的意义； ? 4 、了解葡萄酒国家标准。 2 二、原理 ? 利用费林溶液与还原糖共沸，生成氧化亚铜 沉淀的反应，以次甲基蓝为指示液，以样品 或经水解后的样品滴定煮沸的费林溶液，达 到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲 基蓝还原为无色，以示终点。根据样品消耗 量求得总糖或还原糖的含量。 3 4 5 6 三、试剂 ? 盐酸溶液（ 1 ＋ 1 ）； ? 费林溶液； ? 标准葡萄糖溶液 2.5 g ／ L ； ? 次甲基蓝指示液 10g ／ L ； ? 氢氧化钠溶液： 200 g ／ L 。 7 四、测定步骤 ? 1 、试样的制备 ? 测总糖用试样：准确吸取一定量的样品（ V1 ）于 100mL 容量瓶中，使之所含总糖量为 0.2 ～ 0.4 g ， 加 5 mL 盐酸溶液（ 1 ＋ 1 ） . 加水至 20 mL ，摇匀。 于 68 ± 1 ℃ 水浴上水解 15 min ，取出，冷却。用 200 g ／ L 氢氧化钠溶液中和至中性，调温至 20 ℃ ， 加水定容至刻度（ V2 ）。 ? 测还原糖用试样：准确吸取一定量的样品（ V1 ）于 100 mL 容量瓶中，使之所含还原糖量为 0.2 ～ 0.4g ， 加水定容至刻度。 8 ? 2 、 样品测定 ? 以试样代替葡萄糖标准溶液，参照费林试剂 标定同样操作，记录消耗试样的体积（ V3 ）， 结果按式（ 4 ）计算。 ? 测定干葡萄酒样品时，加入一定量样品水解 液，正式滴定需用葡萄糖标准溶液滴定至终 点。 9 五、计算 ? 式中： X —— 总糖或还原糖的含量， g ／ L ； ? F —— 费林溶液 Ⅰ 、 Ⅱ 各 5 mL 相当于葡萄糖的克数， g ； ? V1 —— 吸取的样品体积， mL ； ? V2 —— 样品稀释后或水解定容的体积， mL ； ? V3 —— 消耗试样的体积， mL ； ? G —— 葡萄糖标准溶液的准确浓度， g ／ mL ； ? V —— 消耗葡萄糖标准溶液的体积， mL 。 1000 ) / ( 3 2 1 ? ? ? ? ? V V V V G F X 1000 ) / ( 3 2 1 ? ? ? V V V F X 10 六、注意事项 ? 1 ．葡萄糖与斐林试剂的反应特别复杂，且随 反应条件而变化，因此，不能根据化学反应 方程式直接计算，而是用已知浓度的葡萄糖 标准溶液标定的方法进行计算，或按编制的 还原糖检索表来计算。在测定过程中要严格 按照所规定的操作条件，如三角瓶规格、加 热时间、滴定速度等。 11 ? 2 ．斐林试剂甲、乙液应分别贮存，用时才混 合，否则酒石酸钾钠铜配合物长期在碱性条 件下，会缓慢分解。 六、注意事项 12 ? 3 ．滴定时必须在沸腾条件下进行，其原因： 一是可加快还原糖与 Cu2+ 的 反应速度；二是 次甲基蓝变色反应是可逆的，还原型次甲基 蓝遇空气中氧后又变为氧化型的蓝色。此外， 氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧化。 保持反应液沸腾可防止空气进入，避免次甲 基蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。 六、注意事项 13