【1】生物样本中蛋白质的提取及测定(分子医学实验).pdfVIP

《分子生物学实验》 实验报告 实验名称：生物样本中蛋白质的提取及测定 姓 名： 杰 学 号： 3140104666 组 别： 同组同学： 唐曦 文案大全 实用标准文档 带教教师： 伟 俞萍 实验日期： 2015 年 9 月 15 日 目录 1.原理： 3 1.1 生物样本中蛋白质的提取 3 1.2 生物样本中蛋白质的测定 3 1.2.1 Lowry 法 3 1.2.2 考马斯亮蓝法 4 1.2.3 紫外吸收法 4 2.操作步骤 4 2.1 生物样本中蛋白质的提取 4 2.2 生物样本中蛋白质的测定 5 2.2.1 Lowry 法 5 2.2.2 考马斯亮蓝法 5 2.2.3 紫外吸收法 5 3 、实验结果 6 3.1 原始数据 6 3.1.1 Lowry 法 6 3.1.2 考马斯亮蓝法 7 3.1.3 紫外吸收法 7 文案大全 实用标准文档 3.2 数据处理 8 3.2.1 Lowry 法 8 3.2.2 考马斯亮蓝法 9 3.2.3 紫外吸收法 10 4.讨论： 11 1. 原理： 1.1 生物样本中蛋白质的提取 离体不久的组织， 在适宜的温度及 pH 等条件下， 可以进行一定程度的物质 代谢。 因此，在生物化学实验中， 常利用离体组织来研究各种物质代谢的途径与 酶系作用， 也可以从组织中提取各种代谢物质或酶进行研究。 但生物组织离体过 久，其所含物质的含量和生物活性都将发生变化。 例如， 组织中的某些酶在久置 后会发生变性而失活； 有些组织成分如糖原、 ATP 等，甚至在动物死亡数分钟至 十几分钟， 其含量即有明显的降低。 因此，利用离体组织作代谢研究或作为提取 材料时， 都必须迅速将它取出， 并尽快地进行提取或测定。 一般采用断头法处死 动物，放出血液， 立即取出实验所需的脏器或组织， 除去外层的脂肪及结缔组织 后，用冰冷的生理盐水洗去血液 （必要时可用冰冷的生理盐水灌注脏器以洗去血 液），再用滤纸吸干，即可用于实验。取出的脏器或组织，可根据不同的方法制 成不同的组织样品。包括组织糜、组织匀浆、组织浸出液。由于动物肝脏细胞比 较脆弱， 易于破碎， 故本实验选用小鼠肝脏细胞作为实验材料， 采用匀浆法法将 其破碎，然后加入样品提取液使蛋白质溶解， 用高速离心法弃去细胞碎片。 收集 上清液后可进行蛋白质定量分析。 1.2 生物样本中蛋白质的测定 1.2.1 Lowry 法 1921