细胞色素C分离纯化.pptVIP

细胞色素C 的分高纯化 人造沸石吸附细胞色素C 人造沸石为铝酸钠,它是一种阳离子 交换剂,细胞色素C分子刚好进入它的表 面空隙。在pH7.5(pHpI)时,细胞色 素C呈正电荷,它可与沸石分子上的钠离 子发生交换,从而被沸石吸附。 NH3 NH+Z COOH COOH 用25%硫酸铵洗脱,又可将细胞色素C 交换下来。硫酸铵的主要作用是降低沸 石对细胞色素C的亲和力。 NH,+Z +(NHSO Z NH COOH 人造沸石在酸性条件下分解,在碱怛 条件下变粘,所以在中性条件下使用 二,蛩白质的盐析作用 维持蛋白质亲水胶体特性的两个重要因 素是蛩白质分子表面的电荷和水化膜,·其 中任何 因素受到破坏,都会降低胶体 的稳定性,使蛋白质分子聚集而发生泂淀 利用盐析沉淀蛋白质的基本原理:盐 在水溶液中电高所形成的正负离子可吸引 水分子,从而夺取蛋白质分子上的水化膜 还可中和部分电荷,致使蛋白质聚集,从 而达到盐析沉淀蛋白质的目的 LOH 带正电 等垲点 带贠电菏 〔亲水 亲水) 亲水) 水 水 概水 博雪计m自 带正电荷 带负电荷 於 沉淀 疏水) 蛋白质汎淀图