质粒提取原理和方法[汇编] .pdfVIP

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  • 2020-07-11 发布于福建
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质粒 DNA提取的原理及方法 碱裂解法质粒 DNA 提取原理 质粒 DNA 提取主要包括以下几个方面: 如 何将细胞裂解释放质粒 DNA,如何将质粒 DNA 和基因组 DNA 分离开来,如何去除 RNA 污染,如何去除蛋白质和其它杂质。 质粒提取方法中,最常用的方法是碱裂解 法,它具有得率高,适用面广,快速,纯 度高等特点。其原理是: 强碱性条件下,质粒 DNA 和基因组 DNA 同时从细胞中释放出来,并发生变性。在 pH 中性,并有高盐浓度存在的条件下, 质 粒 DNA 会迅速发生复性,仍为可溶性状 态,染色体 DNA 之间交联形成不溶性网状 结构,在去垢剂 SDS作用下,染色体 DNA 与变性蛋白质和细胞碎片结合形成沉淀, 通

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