02微生物实验室菌种管理系统规程(3.11审核)2.pdf

取 代 新文件 文件发放号 涉及部门： 质监科 质检科 1、目 的： 规微生物试验用菌种的管理，确保菌种的有效使用。 2、适用围： 微生物试验用菌种的管理。 3、责 任 者： 质检科负责人、微生物试验人员、菌种管理人员 4、正 文： 4.1 概念 a、标准菌株： 由国或国际菌种保藏机构保藏的， 遗传学特性得到确认和保证并可追溯的菌 株。 b、标准储备菌株：由标准菌株经一次传代得到的培养物。 c、商业派生菌株：由供应商提供的所有特性与标准菌株等效的菌株。 d 、工作菌株：由标准储备菌株经传代得到的培养物。 e、代：将活的微生物接种到新鲜培养基中进行培养，并希望获取新的微生物培养物。这种 操作方式，新培养物对接种培养物而言就称为一代。 4.2 菌种的采购和接收 4.2.1 菌种的采购 4.2.1.1 从药检所或菌种保藏中心等外单位购入菌种斜面或冻干菌种。 4.2.1.2 根据工作需要对购买国保藏中心提供的菌种斜面提前 1 个月填写采购申请单，冻干菌种 提前 2 个月申请购买，国外保藏中心提供的菌种应提前 3 个月申请购买。 4.2.2 菌种的接收 4.2.2.1 检定菌应设专人保管，管理人员应接受过专业培训，有足够的菌种保存经验。 4.2.2.2 接收菌种时，应核实菌种的名称、编号、传代代数、数量、有效期等，并调查清楚菌种 的保存条件和注意事项。 接收时应填写菌种接收登记表。容包括：菌种名称、菌种保藏中心编号、传代次数、接收日期、 菌种来源等。 4.2.3 对新购入的冻干菌种在使用前应按要求对其进行生物形态确证试验和纯度鉴定， 由于新购 买的菌种斜面已由菌种提供单位做过生物形态确证试验和纯度鉴定，所以传代 5 代以的菌种斜 面不需要进行纯度鉴定。 4.2.4 对新购入的斜面菌种应在 2～8℃保存，并应在 1 周转接。 4.3 菌种的复苏 4.3.1 使用人员根据需要应向菌种管理人员领取菌种，仔细核对标签上菌名、编号，并在《菌种 接收及领用登记表》上记录菌名、数量、领用人、领用日期等信息。 4.3.2 菌株解冻后不得重新冷冻和再次使用。 4.3.3 菌种复苏应在生物安全柜操作。 4.3.4 常用菌种接种用培养基和培养条件表 菌种名称 接种用培养基 培养条件 大肠埃希菌 Escherichia coli 营养肉汤或营养琼脂培养基 30-35 培养 18-24 小时 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus 营养肉汤或营养琼脂培养基 30-35 ℃培养 18-24 小时 aureus 铜 绿 假 单 胞 菌 Pseudomonas 营养肉汤或营养琼脂培养基 30-35 ℃培养 18-24 小时 aeruginosa 枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis 营养肉汤或营养琼脂培养基 30-35 ℃培养 18-24 小时 短小芽孢杆菌 Bacillus pumilus 营养肉汤或营养琼脂培养基 30-35 ℃培养 18-24 小时 藤黄微球菌 Micrococcus luteus 营养肉汤或营养琼脂培养基 30-35 ℃培养 18-24 小时 沙门菌 Salmonella 营养肉汤或营养琼脂培养基 30-35 ℃培养 18-24 小时 生孢梭菌 Clostridium sporogenes 硫乙醇酸盐流体培养基 30-35 ℃培养 18-24 小时 白色念珠菌 Candida albicans 改良马丁培养基或改良马丁琼脂 23-28 ℃培养 24-48 小时 黑曲霉 Aspergillus niger 改良马丁琼脂培养基