双水相萃取全解.ppt

二、双水相萃取工艺流程操作 工艺流程主要由三部分组成： ? 目标产物的萃取 ? 聚合物（ PEG) 的循环 ? 无机盐的循环 双水相萃取工艺流程图 上相 萃取液 PEG 无机盐 ATPE 相似相溶原理 相体系回收示意图 PEG 的循环 在大规模双水相萃取过程中，成相材料 的回收和循环使用，不仅可以减少废水处 理的费用，还可以节约化学试剂，降低成 本。 PEG 回收有 2 种方法：一种即前面所述 的加入盐使蛋白质转入富盐相来回收 PEG ， 一种是将 PEG 通过离子交换树脂，洗脱剂先 洗出 PEG ，再洗出蛋白质。现在常用的方法 是将第 1 步萃取的 PEG 相或除去部分蛋白质 的 PEG 相循环利用。 无机盐的循环 一种方法是将无机盐相冷却，如将含 磷酸钠的盐相冷却到6℃，使盐结晶析出， 然后用离心机分离收集；另一种是用电渗 析法、膜分离法回收盐类或除去 PEG 相的 盐。双水相萃取所用的设备一般都是其他 两相体系如水和有机溶剂体系所通用的设 备，有商业化的混合器和沉淀器系统以及 离心分离机已成功应用于双水相萃取。 尽管刚开始应用时，大多数双水相萃 取是间歇式的，但此技术更适合于错流萃 取的连续生产，这样可有效利用空间和时 间，尤其是在与其他分离技术如凝胶过滤、 膜分离等相结合使用时。 1988 年， Hustedt 等人证明在工业生产规模上可将 双水相体系用于连续错流萃取延胡索酸酶 和青霉素配基转移酶。 三、影响双水相萃取的因素 影响双水相萃取平衡的主要因素有： 组成双水相体系的高聚物类型、高聚物 的平均分子量和分子量分布、高聚物的 浓度、成相盐和非成相盐的种类、盐的 离子浓度、 pH 值、温度等。 1 ）聚合物的类型 不同聚合物的水相系统显示出不同的疏水 性，聚合物的疏水性按下列次序递增：葡萄 糖硫酸盐糖＜葡萄糖＜羟丙基葡聚糖＜甲基 纤维素＜聚乙二醇＜聚丙三醇，这种疏水性 的差异对目的产物的作用是重要的。 2 ）聚合物及其相对分子质量 不同聚合物的水相系统，疏水性不同； 同一聚合物，疏水性随分子量增加而增加， 其大小的选择取决于萃取过程的目的和方 法，在 PEG/Dex 体系中， PEG 分子量的减少， 会使萃取液在两相中的分配系数增大，当 PEG 的分子量增加时，在质量浓度不变的 情况下，亲水性蛋白质不再向富含 PEG 相 中聚集而转向另一相。 双水相萃取技术 ( aqueous two-phase extraction ) 主要内容： 一、双水相萃取的基本理论 二、双水相萃取工艺流程操作 三、影响双水相的因素 四、双水相萃取的应用 五、双水相萃取技术的发展 ? 双水相萃取现象最早是 1896 年由 Bei jerinck 在琼脂与可溶性淀粉或明胶混合时发现的， 这 种 现 象 被 称 为 聚 合 物 的 “ 不 相 溶 性 ” (incompatibility) 。 ? 20 世纪 60 年代瑞典 Lund 大学的 Albertsson P A 及其同事们最先提出双水相萃取技术并做 了大量的工作。 ? 70 年代中期西德的 Kula M R 和 Kroner K H 等 人首先将双水相系统应用于从细胞匀浆液中 提取酶和蛋白质，大大改善了胞内酶的提取 效果。 前 言 一、双水相萃取的基本理论 1 、双水相体系的组成 2 、双水相萃取的特点 3 、双水相萃取原理 1 、双水相体系的组成 双水相体系的主要成因 —— 聚合物的 不相溶性 双水相现象是当两种聚合物或一种聚 合物与一种盐溶于同一溶剂时，由于聚合 物之间或聚合物与盐之间的分子空间阻碍 作用，无法相互渗透，当聚合物或无机盐 浓度达到一定值时，就会分成不互溶的两 相，因为使用的溶剂是水，所以称为双水 相。 ① 聚合物 ∕ 聚合物双水相 当 2 种聚合物混合时，由于 2 种聚合物 间存在较强的斥力或空间阻碍，使 2 者无 法相互渗透，不能形成均一相，故达到平 衡后形成两相，这 2 种聚合物分别位于互 不相溶的两相中，即形成聚合物 / 聚合物 双水相体系。 聚合物双水相形成机理 两种聚合物 相互混合 混合 体系熵的增加 两个因素 分子间作用力 分离（聚合物的不相容性） 分相 富含不同聚合物的两相 形成双水相的双聚合物体系很多， 如聚乙二醇 (polyethylene glycol, PEG)/