RNAi在癌症治疗中的应用_图文.doc

药学学报Acta Pharmaceutica Sinica2005,40(3:193—198 RNAi在癌症治疗中的应用 谭余良1’2,殷勤伟h (中国科学院1.生物物理研究所系统生物学研究中心,北京100101;2.研究生院,北京100039 关键词:RNA干扰;双链RNA;基因沉默;癌症;siRNA 中图分类号:R963文献标识码:A文章编号:0513—4870(200503—0193—06 Application of RNAi to cancer therapy TAN Yu—lian91一.YIN James Q1+ (J.Institute of Biophysics,Chinese Academy of Sciences,Be彬ng100101,China; 2.Graduate School of Chinese Academy of Sciences,Beijing100039,China Key words:RNAi;dsRNA;gene silencing;cancer;siRNA 1998年,Fire等…发现当外源双链RNA (dsRNA分子被注入线虫体内后能导致其同源基因沉默,他们把这种现象称为RNA干扰(RNA interference,RNAi。RNAi是生物界普遍存在的一种调控基因表达的有效方式和鉴定基因功能的重要手段,与植物体内的转录后基因沉默o及真菌体内基因抑制o有密切联系。RNAi由长约21—23个核苷酸的双链RNA分子(siRNA,small interfering RNAE4]介导,以序列特异的方式抑制同源基因的表达,其副作用也很小,这是siRNA在基因治疗方面的重要优势。因此,RNAi可在疾病的预防和治疗中起重要的作用。5。。 癌症是一种基因组的疾病,其特征为癌基因的激活和抑癌基因的失活。6J。除了这些基因突变外,肿瘤的发生还伴随着许多其他遗传物质基础未知的表型的改变。了解这些分子机理有利于我们发现抗癌药物作用的靶点并开发防治癌症的新方案一o。近年来,人们利用siRNA研究癌基因的功能,在癌症治疗方面取得了重大进展。人们通过向癌细胞内导人体外合成的siRNA分子或能稳定表达siRNA 分子的质粒或病毒载体来研究特定癌基因或抑癌基 收稿日期:2004-06-30. +通讯作者Tel/Fax:86一10 E—mail:jqwyin@sur6.ibp.ac.en 因的功能。有理由相信RNAi将在人类攻克癌症的过程中将起重要作用。 1RNAi的机制 从1998年,Fire等发现RNAi现象后,人们便开始对RNAi的机制进行研究。通过对线虫的研究,发现RNAi包括两个重要步骤(图1,第一步即siRNA的合成∞J。生化研究表明,siRNA是一个由57磷酸末端和有两个碱基冗余的3’羟基末端构成的长约21—23nt的双链RNA(dsRNA分子一1。siRNA段由Dicer酶从dsRNA分子上切割而来,是一个耗能过程,需要ATP的参与。4’9J。Dicer是RNase III核酸酶家族的成员,RNase III家族在进化中非常保守,广泛存在于线虫、果蝇、拟南芥、真菌及哺乳动物体内。Dicer含有一个特殊结构,包括一个螺旋区和两个Rnase III催化区。此外,Dicer还包括一个与RDEl/QDE2/AGRONAuTE等蛋白相互作用的区域——PIWI区010]。Dicer能够产生两种功能不同的小RNA:microRNA(miRNA和siRNA。miRNA能干扰mRNA的翻译,而siRNA能与沉默复合物(RISC结合¨1I,介导RISC对靶mRNA的切割。切割通常发生在与siRNA同源部分的中点,离siRNA反义链5’端10个碱基处一J。RISC与靶mRNA的结合需要高度的序列特异性,甚至是1—2个碱基不能互补也会阻止RNAi途径的实现¨2】。 　万方数据 人们常常把肿瘤与癌症混为一谈,认为肿瘤就是癌症,癌症就是肿瘤,其实两者有根本的不同。肿瘤包括良性肿瘤和恶性肿瘤两类,恶性程度介于两者之间的又称为“交界瘤”,所以肿瘤不等于癌症。 恶性肿瘤共有1000多种,共分两大类,即癌与肉瘤。命名原则是根据发生部位和组织来源,在其名称后面加上“癌”字或“肉瘤”字样的均为恶性肿瘤。/ 生长于上皮组织的恶性肿瘤称为“癌”。所谓上皮组织,是指分布在人体表面和人体内所有的空腔脏器,如空腔、食管、胃、肠管等“的细胞,这些器官如有恶性肿瘤生长,则分别称为口腔癌、食管癌、胃癌、肠癌等。 凡是人体结缔组织如脂肪、肌肉、骨骼、淋巴、造血组织等发生的恶性肿瘤,统称为“肉瘤“,如脂肪肉瘤、平滑肌肉瘤、骨肉瘤、淋巴肉瘤等。/html/exlblby/196.htm 人们常易把良性肿瘤和恶性的肉瘤的称呼相混淆,如脂肪瘤、