维生素AD胶丸中维生素A的含量测定 文档资料.pptVIP

维生素 AD 胶丸中 维生素 A 的含量测定 维生素 A 的结构为具有一个共轭多烯醇侧链 的环己烷，由于其中有多个不饱和键，性质不稳 定，易被空气中氧或氧化剂氧化，易被紫外光裂 解，并且其对酸不稳定。其醋酸酯比维生素 A 稳 定，临床使用一般将本品或棕榈酸酯溶于植物油 中应用。因此，维生素 A 及其制剂除需密封在凉 暗处保存外，还需充氮或加入合适的抗氧剂。 维生素 A 与氯仿、乙醚、环己烷或石油醚能 任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。 一、实验目的 二、主要仪器和试剂 紫外分光光度仪， 100ml 容量瓶，烧杯若 干个，维生素 A 胶丸（规格 2.5 万单位 / 粒）环己 烷，乙醚 掌握 UV 三点校正法的原理和维生素 A 含量 测定的方法。 三、实验原理 本法是在三个波长处测得吸收度，根据校正公式 计算吸收度 A 校正值后，再计算含量，故本法称为 “三点校正法”。该原理主要基于： （ 1 ）杂质的无关吸收在 310nm ～ 340nm 的波长范围内 几乎呈一条直线，且随波长的增长吸收度下降。 （ 2 ）物质对光吸收呈加和性的原理。即在某一样品的吸 收曲线上，各波长处的吸收度是维生素 A 与杂质吸 收度的代数和，因而吸收曲线也是二者的叠加。 （一）胶丸内容物平均重量的测定 四、实验过程 取胶丸 20 粒，精密称定，用注射将内容物抽 出，再用刀片切开丸壳，用乙醚逐个洗涤丸壳三次， 置 50 ml 烧杯中，再用乙醚浸洗 1 ～ 2 次，置通风处， 使乙醚挥散，精密称定，算出每丸内容物的平均重 量。 四、实验过程 1. （二）供试品溶液的制备与测定 取维生素 AD 胶丸内容物适量，精密称定，用环己 烷溶解并定量稀释成每 1 mL 中含 9 ～ 15 单位的溶液。 按照分光光度法，测定其吸收峰的波长，并在下列各 波长处测定吸收度。计算各吸收度与波长 328 nm 处吸 收度的比值和波长 328 nm 处的 E 1% 1cm 值。 1. 第一法 [ 计算 ] ? ① 求 ：由 A= × C × L ， ? 求得 =A/ （ C × L ）。 ? ② 求效价（ IU/g ）：效价系指每克供试品中所 含维生素 A 的国际单位数（ IU/g ）。 ? 即 IU/g= × 1900 。 ? ③ 求维生素 A 占标示量的百分含量： ? 标示量 %= （ A × D × 1900 × W × 100% ） / （ W × 100 × L ×标示量）× 100% 。 [A 值的选择 ] ? 首先计算吸收度比值（即 A i /A 328 ） ? ① 如果最大吸收波长在 326nm ～ 329nm 之间， 并分别计算 5 个波长下的差值，均不得超过 ± 0.02 时，则不用校正公式计算吸收度，而直接 用 328nm 处测得的吸收度 A 328 求得。 ? ② 如果最大吸收波长在 326nm ～ 329nm 之间， 并分别计算 5 个波长下的差值，如有一个或几个 超过± 0.02 ，这时应按以下方法判断： ? 若 A 328 （校正） 与 A 328 的吸收度相差不超过± 3.0% ，则不 用校正吸收度，仍以未经校正的 A 328 求得 。 ? 若 A 328 （校正） 与 A 328 的吸收度相差在 -15% ～ -3% 之间， 则以 A 328 （校正） 得 。 ? 若 A 328 （校正） 与 A 328 的吸收度相差小于 -15% 或大于 +3% ，则不能用本法测定，而应用第二法（皂化法）测定 含量。 ? ③ 如果最大吸收波长不在 326nm ～ 329nm 之间，也不能 用本法测定，而应用第二法（皂化法）测定含量。 ? 第一法校正公式： A 328 ( 校正 )=3.52(2A 328 -A 316 -A 340 ) 维生素 A 吸收度差值 ? 由扫描结果得最大吸收波长为 327.7nm （ 326~329nm ） ? 各个差值均不超过± 0.02 ，不需用校正公式。