秀丽线虫研究和饲养.pptVIP

秀丽隐杆线虫的饲养及研究用途 By王传杰 介绍 秀丽 形动物 虫是 门细雄胞 胞 性 中经条 统解 约占整 个动 明,能感 知气嗉 易在显 黴镜 图1秀丽隐杆线虫各期虫体形态100× Fig. I The morphology of different stage of C. elegans A:卵;B成虫;C:1-4期幼虫 饲养与冻存 备试剂 大肠杆黄OP50 大肠杆黄OP50是尿密啶潦漏突变型,作为 秀丽隐杆线虫的食物。 NGM培养基—1000ml的NGM培养基内加有:3 nAcL2.5g蛋 白胨,17g琼脂,1mol/LK2HPo4-KH2Po4缓冲漩 (pH=6.0)25ml,975ml蒸馏水,天菌后加入分别抽滤除菌的1m胆圄 蹿液(5mgm乙醇),1mol/LMgs041ml,1moL的Cacl21ml M9缓冲液——每升缓冲液中含15.12gNa2HPO4#12H20(或 6gNa2HPO4), 3gKH2Po4, 5gNaCl,0. 25gMgSo4#7H20, i Je 用现配 S缓冲液—0.1mol/LNaC|,0.05mmo/LK2HPO4KH2PO4缓 冲液(pH=6.0) 喂养方法 用冰M9缓冲掖清洗虫体 置4C环境20min 1000r离心,弃上清,沆淀物用M9缓冲液重悬 置4℃环境20min弃上清 〉取200u沆淀物以靠接法接种到涂有大肠杆黄O