T淋巴细胞亚群检测操作程序PPT版.pptxVIP

学 海 无 涯 一、目的： 保证流式细胞仪检测外周血中 T 淋巴细胞亚群检验的工作质量，旨在保证 正确的 T 淋巴细胞亚群检测标准操作程序和控制检测结果的精确度与准确度。 二、修改程序： 本标准操作程序的改动，可由任一使用本 SOP 的工作人员提出，并报经下 述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任），方可改动。 三、适用范围： 外周血中 T 淋巴细胞亚群的绝对计数检测。 四、实验原理： 人的 T 淋巴细胞根据其生物功能和细胞表面抗原的表达可分为二大类：辅助 /诱导 T 细胞和抑制/细胞毒 T 细胞。辅助/诱导 T 淋巴细胞表达 CD3 和 CD4；抑 制/细胞毒 T 细胞表达 CD3 和 CD8。利用各种单克隆抗体与淋巴细胞表面抗原结 合，再配多色荧光染料以及绝对计数管，即可以把 T 淋巴细胞区分为两种亚型， 进面得到各亚群的绝对值。 六、主要试剂： CD4-FITC／CD8-PE／CD3-APC／CD45-PC7 (美国 BCs 公司；CAT: IM3548)， 七、实验操作： 1、标本采集：使用 EDTA-K2 抗凝真空采血管，抽取静脉血 2ml。 2、染色和固定细胞： 标本管编号 A，取一只流式专用管 A1。 A1 管加入 CD4-FITC／CD8-PE／CD3-APC／CD45-PC7 20ul。 A1 管中再加入全血 100ul，混均。