《非金属矿物材料脱除玉米赤霉烯酮性能检测方法》技术标准.pdfVIP

非金属矿物材料脱除玉米赤霉烯酮性能检测方法 1 范围 本标准规定了非金属矿物材料脱除玉米赤霉烯酮性能的术语和定义、性能试验和评价方 法。 本标准适用于脱除饲料中玉米赤霉烯酮的非金属矿物材料产品，非金属矿物材料产品脱 除其它霉菌毒素性能的检测可参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件， 其后所有的修订版均不适用本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修 改版）适用于本标准。 GB/T 19540-2004 饲料中玉米赤霉烯酮的测定 GB/T 28716-2012 饲料中玉米赤霉烯酮的测定 免疫亲和柱净化-高效液相色谱法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 玉米赤霉烯酮 镰刀菌属在所污染的玉米中生长时产生的次级有毒代谢产物。 3.2 非金属矿物材料 以天然非金属矿物或岩石为主要原料制造的非金属材料。 3.3 脱霉性能 非金属矿物材料脱除霉菌毒素的性能。 4 原理 将定量的非金属矿物材料与一定浓度的霉菌毒素溶液作用，通过测试达到平衡后上清液 中霉菌毒素含量变化计算吸附率，用吸附率评价非金属矿物材料的脱霉性能。 将吸附实验后离心沉淀物与定量的不含霉菌毒素溶液作用，通过测试达到平衡后上清液 内霉菌毒素含量变化计算解吸率，用解吸率评价非金属矿物材料脱霉性能的稳定性。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪 5.2 分析天平：感量0.001 g 。 5.3 振荡器：往复式。 5.4 离心机 5.5 微量连续可调取液器及配套吸头：10 μL-200 μL 。 6 试剂和材料 6.1 玉米赤霉烯酮 6.2 胃蛋白酶，1 g 胃蛋白酶中需含有800~2 500 个活度单位 6.3 胰酶，1 g 胰酶中需含有800~2 500 个活度单位 6.4 甲醇、稀盐酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠均为分析纯； 6.5 水，实验中所使用水均为超纯水。 警告： 1.凡接触玉米赤霉烯酮的容器，需浸入 1%次氯酸钠（NaClO ）溶液12 h，清洗，备用。 2 2.为了分析人员安全，操作时要带上医用乳胶手套。 7 实验方法 7.1 溶液的配制 磷酸盐缓冲溶液： 0.2 mol/L 的磷酸氢二钠，取磷酸氢二钠71.46 g，加水溶解，定容至1 L ； 0.2 mol/L 的磷酸二氢钠，取磷酸二氢钠31.21 g，加水溶解，定容至1 L 。 人工胃液：量取16.4 mL 0.1 mol/L 稀盐酸，加入到800 mL 水中，再加入10 g 胃蛋白酶， 振荡摇匀后，加水定容至 1 L 。利用磷酸盐缓冲溶液调节pH 至3.5 。 人工肠液：称取磷酸二氢钾6.8 g，加水500 mL 溶解；称取胰酶10 g 加水200 mL 溶解， 将两溶液混合，再加水定容至1 L 。用磷酸盐钠缓冲液调节pH 值至6.5。 玉米赤霉烯酮储备液：取玉米赤霉烯酮10 mg ，加入甲醇定容至100 mL (100 mg/L) 。 玉米赤霉烯酮标准液：在以上玉米赤霉烯酮储备液基础上，用所配制的pH 值为3.5 和 pH 值为 6.5 的人工胃液和人工肠液中配制玉米赤霉烯酮标准液，标准液内玉米赤霉烯酮的 浓度为5 mg/L。 7.2 吸附实验 分别称取0.1 g 非金属矿物材料放入2 个试管内，编号1 和2 。量取100 mL 人工胃液玉 米赤霉烯酮标准液加入1 号试管内，同时量取人工肠液玉米赤霉烯酮标准液100 mL 加入2 号试管内。再取2 个试管，编号3 和4 ，3 号试管加入人工胃液玉米赤霉烯酮标准液，4 号 试管加入人工肠液玉米赤霉烯酮标准液。将四支试管同时置于37℃恒温振荡器中，150 r/min 振荡吸附4 h 。吸附结束后，在5000 r/min 转速下离心10 min 。用微量连续可调取液器移取 200 μL上清液装入进样瓶内进行高效液相色谱分析。 每个处理均做3 个平行，以其平均值作为该点测定结果，该测试结果为吸附样品峰面积 值（解吸前峰面积值），包括人工胃液吸附样品峰面积、人工肠液样品峰面积；以及玉米赤 霉烯酮标准液峰面积，包括人工胃液标准液和人工肠液标准液。 7.3 解吸实验 将6.2 吸附实验中1 号和2 号试管离心后的沉淀物移