限制性内切酶和DNA体外重组基本含义.pptVIP

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2020-07-25 发布于福建
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限制性内切酶和DNA体外重组基本含义.ppt

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DNA重组技术的基本含 1、基本概念 DNA重组技术也称为基因克隆或分子克隆。最终目的是把个生物体中的遗传信息转入另一个生物体 2、基本步骤目的基因的提取:供体生物基因或称外源基因的提取限制性酶切:目的基因切成不同酶接:连接到另一DNA分子上 (克隆载体转化:将这个重组DNA分子转入 = 筛选和鉴定:对吸收了重组DNA 的受体细胞进行筛选和鉴定基因表达:进行培养,检测外援基因是否表达。限制性内切酶 1、限制性内切酶的定义是指已被证明是限制修饰系统中的一个组成部分,具有识别双链DNA分子中的某种特定核酸序列·并由此切割 DNA双链结构的酶统称为限制性内切酶 2、限制性内切酶的发现 Luria和 Human发现细菌能捋外来的DNA片段在某些专一位点上切断’从而保证其不被外来噬菌体所感染’而其自身的DNA由于被一种特殊的酶所修饰(甲基化)而得以保护这种现象叫做限制一修饰。 Smith和 Wilcox从流感嗜血杆菌中分离到一种酶,能够特异性的切割DNA,这个酶被命名为Hind,这是第一个分离到的限制性内切核酸酶。