VB的测定和方法学.pptVIP

VB 2 的生理作用 ? VB 2 ，又称核黄素，分子式 C 17 H 20 N 4 O 6 ，它是人体必需的 13 种维生素之一，作为维生素 B 族的成员之一， ? VB 2 对于人体的生理作用为： 1. 促进发育和细胞的再生； 2. 促使皮肤，指甲，毛发的正常生长； 3. 帮助消除口腔内，唇，舌的炎症； 4. 增进视力，减轻眼睛的疲劳； 5. 和其他的物质相互作用来帮助碳水 化合物，脂肪，蛋白质的代谢。 国内外研究方法 近年来对 VB 2 测定方法报道较多，如： 1. 高效液相色谱法 2. 流动注射化学发光法 3. 多元线性分光光度法 4. 荧光分光光度法 这些方法操作麻烦，时间较长，本实验用紫外 分光光度法和荧光法测定 VB 2 含量 。 实验思路 1.VB2 片的紫外测定 VB 2 的避光措施 4mg/L VB2 全扫描图 VB2 片全扫描 标准曲线的绘制 Standard Concentration mg/L Readings Std 1 10.00 0.3158 Std 2 12.00 0.3777 Std 3 14.00 0.4432 Std 4 16.00 0.5059 Std 5 18.00 0.5676 Std 6 20.00 0.6301 浓度： 10~20mg/L 标准曲线 A=0.03278· C+3.3059*10 -3 VB2 片的浓度计算 结论：所测样品的 含量为 4.563mg/ 片 ① VB 2 紫外线性范围浓度 ： 0.2~24mg/L A=0.0312c+0.0069 R 2 =0.9998 Standard Concentration (mg/L) Readings Std 1 0.2 0.0082 Std 2 0.5 0.0211 Std 3 1.0 0.0378 Std 4 1.5 0.0523 Std 5 2.0 0.0705 Std 6 4.0 0.1299 Std 7 8.0 0.2672 Std 8 12 0.3828 Std 9 16 0.5063 Std 10 20 0.6280 Std 11 24 0.7528 y = 0.0312x + 0.0069 R 2 = 0.9998 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0 5 10 15 20 25 30 ② VB 2 的紫外加标回收率测定 VB 2 样 品量 VB 2 标准液 （ 200mg/L) Readings 平均值 回收率 5ml 0ml 0.0311 0.0303 0.0307 5ml 0.2ml 0.0404 0.0405 0.0404 132% 5ml 0.3ml 0.0432 0.0421 0.0426 108% 5ml 0.5ml 0.0479 0.0480 0.0479 93.5% ③ 紫外分光光度法 VB 2 检出限 Sample Readings sample 1 -0.0027 sample 2 -0.0018 sample 3 -0.0023 Sample 4 -0.0030 sample 5 -0.0017 sample 6 -0.0028 Sample 7 -0.0031 sample 8 -0.0015 sample 9 0.0005 sample 10 -0.0020 sample 11 -0.0020 紫外分光光度计的检出限 为 0.2515mg/L 。 2.VB2 片荧光法测定 荧光工作参数 灯管类型 :R928 电压 :700V 激发波长 :450nm 发射波长 :530nm 激发狭缝 :6.0nm 发射狭缝 :6.0nm 滤光片状态 : 打开 搅拌子 : 高速 标准曲线： I=465.728C+4.562 R=0.9998 浓度： 0.048~0.96mg/L 计算得， VB 2 药片样品含量为 5.874mg/ 片 Ref.ID Conc. Int Std1a 0.048 24.552 Std1b 0.048 24.575 Std2a 0.072 36.072 Std2b 0.072 36.019 Std3a 0.096 49.461 Std3b 0.096 49.481 Std4a 0.12 60.401 Std4b 0.12 60.191 Std5a 0.144 70.770 Std5b 0.144 70.610 Std6a 0.192 93.952 Std6b 0.192 94.275 Std7a 0.24 121.567 Std7b 0.24 121.107 Std8a 0.288 140.029 Std8b 0.288 139.698 Std9a 0.384 185.399 Std9b 0.384 184.989 Std10a