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淀粉酶产生菌株(纲菌)的
分高纯化及检测
目的要求
了解利用选择性培养基进行Q淀粉酶产生
菌株分离的要求
掌握α-淀粉酶产生菌株相关分离纯化的方
法步骤—稀释涂布平板菌落分离、挑菌
保存平板点植、观察测定透明圈等。
学习在平板上进行a-淀粉酶产生菌株的检
测及产酶量初步判断。
基本原理
分离培养基:利用相关含淀粉平板培养基进
行分离(其它成分根据实际需要添加);
分离方法:采用十倍梯度稀释涂布平板,经
培养后挑取单菌落;
检测方法:利用淀粉遇碘变蓝的性质,平板
加入卢哥氏碘液后,显示淀粉酶扩散水解淀
粉而产生的透明圈情况一一透明圈直径与菌
落直径之比判断
同时可以结合糊化淀粉冷藏后变性透明度
降低,淀粉酶扩散水解淀粉也会产透阴图。一
第一种分离和检测用平板培养基
200mL/组
马铃薯浸液1000m
玉米淀粉10g
琼脂15g
121.3℃灭菌20分钟
每组200m培养基制备10个平板(倒之前轻
摇培养基混匀琼脂和淀粉)。
马铃薯浸液的制备
马铃薯洗净后去皮;
称取去皮200g马铃薯加适量水(约
1000mL)
加热煮沸20分钟后,棉布(纱布)过滤,
清液定容至1000mL备用。
加热过程注意补水
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