α淀粉酶产生菌株分离纯化及检测精选.pptVIP

α淀粉酶产生菌株分离纯化及检测精选.ppt

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淀粉酶产生菌株(纲菌)的 分高纯化及检测 目的要求 了解利用选择性培养基进行Q淀粉酶产生 菌株分离的要求 掌握α-淀粉酶产生菌株相关分离纯化的方 法步骤—稀释涂布平板菌落分离、挑菌 保存平板点植、观察测定透明圈等。 学习在平板上进行a-淀粉酶产生菌株的检 测及产酶量初步判断。 基本原理 分离培养基:利用相关含淀粉平板培养基进 行分离(其它成分根据实际需要添加); 分离方法:采用十倍梯度稀释涂布平板,经 培养后挑取单菌落; 检测方法:利用淀粉遇碘变蓝的性质,平板 加入卢哥氏碘液后,显示淀粉酶扩散水解淀 粉而产生的透明圈情况一一透明圈直径与菌 落直径之比判断 同时可以结合糊化淀粉冷藏后变性透明度 降低,淀粉酶扩散水解淀粉也会产透阴图。一 第一种分离和检测用平板培养基 200mL/组 马铃薯浸液1000m 玉米淀粉10g 琼脂15g 121.3℃灭菌20分钟 每组200m培养基制备10个平板(倒之前轻 摇培养基混匀琼脂和淀粉)。 马铃薯浸液的制备 马铃薯洗净后去皮; 称取去皮200g马铃薯加适量水(约 1000mL) 加热煮沸20分钟后,棉布(纱布)过滤, 清液定容至1000mL备用。 加热过程注意补水

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