透析袋的使用方法.pdfVIP

透析袋在使用前如何处理 透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。 在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分 子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。 透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状， 将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样 品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物 质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留 在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为 “渗出液”或“透析液”。 透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透 析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两 边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是 4℃透析，升高温 度可加快透析速度。 透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的最多的还是用纤维素（再生纤 维素 RC、纤维素酯 CE、PVDF 等）制成的透析膜，目前常用的是美国 美国光谱医学公司（spectrum，上海欧韦达 器科技有限公司是中华 区特约总经销）和美国 Union Carbide （联合碳化物公司，上海欧韦 达 器科技有限公司是华东区特约经销商）生产的各种尺寸的透析管， 截留分子量 MwCO （即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量，缩 写为MwCO）大概有 100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、 20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000 等种类，单 位为道尔顿（D）。 商品透析袋制成管状，其扁平宽度为 8 mm～77 mm 不等。为防干裂， 出厂时都用 10％的甘油处理过，并含有极微量的硫化物、重金属和一 些具有紫外吸收的杂质，它们对蛋白质和其它生物活性物质有害，用 前必须除去。 透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的最多的还是用纤维素制成的 透析膜，目前常用的是美国 Union Carbide （联合碳化物公司）和美 国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管，截留分子量 MwCO （即留 在透析袋内的生物大分子的最小分子量）通常为 1 万左右。 截留分子量越大也就是说透过性越大，一般而言，透析袋截留分 子量越小价格越贵，因为截留的分子越小要求透析袋越密，价格越贵。 透析袋使用前处理： 1. 把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。 2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0) 中将透 析袋煮沸 10 分钟。 3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。 4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0) 中将之煮沸 10 分钟。 前处理也可以 将透析袋放在广口瓶中充满水，松动瓶盖，于 20psi （1.40kg/cm2)高压 灭菌 10min，代替第四步用 1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸 10min 的操 作。 5. 冷却后，存放于 4 度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。若长时 间不用，可加少量叠氮钠 NaN2，以防长菌 。从此时起取用透析袋是 必须戴手套。 6. 用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净。洗净凉干的透 析袋弯折时易裂口，用时必须仔细检查，不漏时方可重复使用。 这样做可以保证透析袋有良好的透析效果。 7.新透析袋如不作如上的特殊处理，则可用沸水煮五至十分钟，再用 蒸馏水洗净，即可使用。 8.佰易聚商城技术说：透析袋不推荐反复使用，如果要反复使用就是 用之前怎么处理的，用后也怎么处理。 9.透析袋要看你购买的是可再生的还是一次性的。即使是可再生的也 请使用于同种蛋白，避免交叉污染。 10.短时间内再次使用的话，可用去离子水洗净后，浸泡于 20% 乙醇溶 液中，使用时务必将乙醇洗净。 11.使用后的透析袋保存方法：.用生理盐水浸泡以去掉蛋白，并用蒸馏 水清洗干净，然后置于 50％乙醇中保存即可 美国美国光谱医学公司生产的透析袋大部分是预处理过的，即用型， 使用前只需用蒸馏水冲洗即可使用，spectra/por7 系列和生物技术级 的透析袋基本不含硫化物和重金属离子。 使用时，一端用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用特制的透析袋夹夹紧， 由另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液，通 常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透