气相色谱仪和液相色谱仪的使用课件.pptVIP

气相色谱仪和液相色 谱仪的使用 《毕业实习》系列教学内容之八 第一节 色谱法概述 一、 色谱法的特点、分类和作用 1. 概述 2. 分类 3. 特点 二、气相色谱分离过程 1. 气相色谱分离过程 2. 分配系数 K 一、 色谱法的特点、分类和 作用 1. 概述 俄国植物学家茨维特在 1906 年使用的装置： 色谱原型装置，如图。 ? 色谱法是一种分离技术 ， ? 试样混合物的分离过程也就是试样中各组 分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的 分配过程。 ? 其中的一相固定不动，称为 固定相 ； ? 另一相是携带试样混合物流过此固定相的 流体（气体或液体），称为 流动相 。 （ 动画） 色谱法 当流动相中携带的混合物流经固定相时， 其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组 分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生 的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移 动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡 ，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而 按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检 测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检 测。 ? 两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础 （动画） 2. 色谱法分类 气相色谱 ： 流动相为气体（称为载气）。 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； 按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱 液相色谱 液相色谱 ： 流动相为液体（也称为淋洗液）。 按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。 离子色谱 ： 液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂为固 定相，不同 pH 值的水溶液为流动相。 二、气相色谱分离过程 气相色谱分离过程是在色谱柱内完成的。 填充柱色谱 : 气固色谱和气液色谱，两者的分离机理不同。 气固色谱的固定相 : 多孔性的固体吸附剂颗粒。 固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。 气液色谱的固定相 : 由 担体和固定液所组成。 固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。 气固色谱的分离机理 : 吸附与脱附的不断重复过程； 气液色谱的分离机理： 气液两相间的反复多次分配过程。 气相色谱分离过程 ? 当试样由载气携带进入色谱 柱与固定相接触时，被固定相 溶解或吸附。 ? 随着载气的不断通入，被溶 解或吸附的组分又从固定相中 挥发或脱附， ? 挥发或脱附下的组分随着载 气向前移动时又再次被固定相 溶解或吸附。 ? 随着载气的流动，溶解、挥 发，或吸附、脱附的过程反复 地进行。 分配系数 K 组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附，或溶解、 挥发的过程叫做分配过程。在一定温度下，组分在两相间 分配达到平衡时的浓度（单位： g / mL ）比，称为分配系数， 用 K 表示，即： 组分在流动相中的浓度 组分在固定相中的浓度 ? K 分配系数 K 的讨论 ? 一定温度下，组分的分配系数 K 越大，出峰越慢； ? 试样一定时， K 主要取决于固定相性质； ? 每个组份在各种固定相上的分配系数 K 不同； ? 选择适宜的固定相可改善分离效果； ? 试样中的各组分具有不同的 K 值是分离的基础； ? 某组分的 K = 0 时，即不被固定相保留，最先流出。 组分在流动相中的浓度 组分在固定相中的浓度 ? K 液相色谱仪（ 1 ） 液相色谱仪（ 2 ） 液相色谱仪（ 3 ） 液相色谱仪（ 4 ） 一、高效液相色谱法的特点 特点：高压、高效、高速 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。 二、流程及主要 部件 1. 流程 2. 主要部件 (1) 高压输液泵 ? 主要部件之一，压力： 150 ～ 350 × 10 5 Pa 。 ? 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（ 10 μm ），液 体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高 速是高效液相色谱的特点之一。 ? 应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性 (2) 梯度淋洗装置 外梯度 : 利用两台高压输液泵， 将两种不同极性的溶剂按一 定的比例送入梯度混合室， 混合后进入色谱柱。 内梯度 :