维持胚胎干细胞多能性与诱导定向分化参考课件.pptVIP

* 用视黄酸处理的鼠胚胎干细胞会分化为神经祖细胞, 再经过 Shh 的特异性小分子拮抗剂 Hh -Ag1 .3处理 , 则定向分化为运动神经元。 PI3 -K 抑制剂 LY294002 能促使体外培养的胚胎干细胞分化为分泌胰岛素的 β 细胞。 抗坏血酸能有效地加强胚胎干细胞向心肌细胞分化。 * 骨髓基质干细胞(MSCs)在地塞米松、8 -甘油磷酸钠 、维生素 C 的诱导作用下 , 能够向成骨细胞分化 小分子化合物 D609 ，β -巯基乙醇(BME)、二甲基亚砜(DMSO)和丁羟基茴香醚(BHA)等能诱导MSCs 向神经元样细胞分化还可以向外胚层的神经元细胞和内胚层的肝卵圆性细胞分化。 由于其来源广泛取材方便, 以及移植时发生免疫排斥反应的程度较低 ,因而是目前临床应用前景较好的细胞替代治疗的靶细胞。 * 神经干细胞(NSCs)是指具有分化为神经元 、星型胶质细胞和少突胶质细胞的能力 ,能够自我更新并能够大量产生神经组织细胞的细胞。它具有多种分化潜能和自我更新能力 。 用 SNP 作为外源性 NO 的供体 , 研究NO 对神经干细胞分化的影响 , 发现 NO 能促进神经干细胞的分化 , 并能促进细胞分化后轴突的发育。 * Thanks！ 个人观点供参考，欢迎讨论 * 鉴定滋养层中关键活性成分 * LIF 通过结合到 LIF 受体(LIF receptor，LIFR)以及 IL-6 家族的一个共受体亚基 gp130 上 从而启动信号级联反应。LIFR 和 gp130 形成异源二聚体然后激活相关的络氨酸激酶， 比如 JAKs 家族。JAK 随后磷酸化 LIFR 胞内尾端的络氨酸残基，磷酸化的 LIFR 反过 来可以作为停靠位点来招募信号转导与转录激活因子 3（signal transducer and activator of transcription 3, STAT3）单体。募集的 STAT3 被 JAK 磷酸化（705 络氨酸）(Wang et al. 2012)，然后 STAT3 形成同源二聚体易位进入细胞核内转录激活靶标基因(Sasse et al. 1997)。 * 过表达 Gbx2 或者 Tfcp2l1，而非 Klf4，就足以维持敲除掉 STAT3 的 ES 细胞自我更新 * Wnt 配体不存在的情况下，GSK3 和 CK1、APC、Axin 会形成一个所谓的“破 坏复合物”，该复合物随后磷酸化 β-catenin。磷酸化的 β-catenin 对泛素化和蛋白酶体介 导的蛋白降解变得易感。相反，如果 Wnt 配体得到激活，信号经由 Frizzled 和 LRP 5/6 受体传递，“破坏复合物”的组装受到抑制，最终导致未磷酸化的 β-catenin 在细胞质中积 累。积累的 β-catenin 然后进入细胞核和 TCF/LEF 家族成员转录因子互作，然后识别通 用 DNA 基序 AGATCAAAGG 并且转录激活 Axin2，Cdx1，T 等靶标基因 * BMP 结合到配体上导致 SMAD1/5/8 同源二聚化，随后和共调节蛋白 SMAD4 互作并激活 Id1/2/3 和 DUSP9 的表达，这些基 因可以抑制神经外胚层的分化。另一方面，LIF/STAT3 通路则抑制小鼠 ES 细胞向中胚层和内胚层分 化。 * * 干细胞与再生医学 姓名：张鑫 学号：2120161211 专业：病理学与病理生理学 导师：李宗金 2016.12.15 维持胚胎干细胞的多能性及诱导定向分化 * ES 细胞多能性相关重要信号通路 小分子化合物在ES细胞中的应用 * ES 细胞在生物医学领域的应用取决于能否自由操纵 ES 细胞的命运。 ES 细胞有许多重要的内源转录因子可以决定其命运，如果不采用基因操作的手段很难控制这些转录因子的内源水平。为此目前研究主要选择改变体外培养条件来控制 ES细胞自我更新或者步入分化的命运。所以，鉴定能够决定 ES 细胞命运的信号通路以及下游的靶标蛋白具有十分重要的意义。 ES 细胞多能性相关重要信号通路 NO.1 * LIF/JAK/STAT3 signaling pathway 体外培养小鼠 ES 细胞需要和灭活的成纤维细胞滋养层共培养 白血病抑制因子（LIF） 撤掉 LIF 致使 ES细胞迅速分