转基因鲤的生态安全检测.pdfVIP

转 基因 鲤 的生 态 安全 检测 自 1984 年朱作言等成功建立鱼类转基因模型以来，许 多国家相继开展了转基因鱼的研究，并取得了一定成果，鱼 类基因转移技术的成功展示了鱼类基因工程育种研究的广 阔前景，转基因鱼也因其具有的优越经济性状和巨大的经济 效益，受到了人们的极大关注，然而转基因鱼要进入商业化 生产还有一系列难题尚未解决，其中生态安全就是人们高度 重视的难题之一，与转基因植物和转基因哺乳动物比，鱼类 具有特殊性，其活动的地域广泛，释放到水体中，几乎不能 回收，若转基因鱼不断逃逸到天然水体中，可能会导致大量 外源基因进入其野生同种或相近种基因组中，随着种群的进 一步扩大，可导致遗传同化，干扰其野生同种或相近种的遗 传背景，对种群的生态平衡产生难以估量的影响，因此，转 基因鱼生态安全性评价和检测方法的基础研究势在必行，目 前一些研究小组正在进行转基因鱼的中试研究，为商业开发 做准备，但相关的安全性研究却是空白， 关于转基因植物生态安全国内外学者做了一些基础研 究，如杂交是否亲和、基因漂移距离、影响花粉传播的因素 等，但未见到有关转基因鱼生态安全检测的报道，国外对转 基因鱼做过净适合度方面的相关实验，并建立了转基因鱼的 基因飘散模型，但是没有进行基因组变异方面的检测，笔者 按一定比例将转基因鲤与养殖鲤混合进行自然交配，应用 A FL P 方法对其子一代基因组进行扫描分析，同时以养殖鲤、 野鲤和松花江哈尔滨江段鲤作为参照，检测不同比例的转基 因鲤亲本对与养殖鲤交配的子一代基因组的变化，通过遗传 多样性，遗传相似度和遗传距离等遗传学参数分析子一代基 因组的变异程度，评价转基因鲤的安全性． 1 材料和方法 1.1 材料 1.2 DNA 的制备及纯度检测 1.3 AFLP 实验 1.3.4 PCR 扩增预扩增引物为 1.4 数据处理 2 结果 2.1 AFLP 扩增指纹图谱 2.2 多态位点及种内遗传多样性参数 2.3 群体间遗传距离及遗传分化度 3 讨论 3.1 遗传多样性水平 一个物种群体内的个体基因水平互有差异，即遗传多样 性，通常表现出各种遗传变异，进而反映物种的进化潜力及 对环境的适应性，本研究采用 AFLP 方法对 8 个鲤群体进行 分析，结果显示 8 个群体的遗传多样性略偏低， Neis 多样 指数在 0.2545 到 0.2076 之间， Shannon 信息指数在 0.3049 到 0.3737 之间，对 8 个群体的Ⅳ。，Ⅳ。和 I 比较显示， 都是 Y 组最高， H 组最低，总的趋势是 YDZ1% 10%25%5 0%60%H．多态位点的变化也具有相同的趋势，说明随着转 基因亲本所占比例的增加，群体的遗传变异在减少，遗传多 样性在变小，这是由于 Y 组是抚远江段的野鲤，属于野生种 群，遗传资源尚未遭到破坏，保持了良好的遗传多样性． DZ 养殖鲤多样性要低于野生鲤，一是由于养殖鲤是人们经过多 代选育形成的，在累代选育中都筛选具有典型优良性状的少 量后代作为亲本，这样就不可避免的造成了后代的基因组多 态性降低；二是长期的人工养殖实践，使养殖鲤处于简单的 生态环境下（池塘养殖条件），维持生存和生长过分的依赖 于不变环境条件，适应环境变化和基因突奕的发生率减少导 致多态性下降，而笔者使用的转基因鲤亲本是由外源大马哈 鱼生长激素基因转入养殖鲤鱼受精卵所得，由于外来基因的 插入和不定点整合，改变了供体亲本基因组的结构，形成了 一个新的群体，当其与养殖鲤进行杂交时，随着转基因亲本 比例的增加，子一代的遗传特点就越倾向于转基因鱼，本实 验结果显示随着转基因亲本比例的增加其遗传多样性变小， 可以推测得出转基因鱼由于转入了外源基因，破坏了原有的 基因组结构，使其遗传多样性降低．