第九章 酶的非水相催化.pptVIP

Enzymatic catalysis in Non-aqueous system 酶在非水介质中进行的催 化作用称为酶非水相催化 第六章 酶的非水相催化 有机介质中的酶催化是指酶在 含有一定量水 的有机溶剂 中进行的催化反应。 适用于底物、产物两者或其中之一为疏水性物质的酶催 化作用。 6.1.1 有机介质中的酶催化 6.1.2 气相介质中的酶催化 酶在气相介质中进行的催化反应。 适用于底物是气体或者能够转化为气体的物质的酶催 化反应。 6.1.3 超临界流体介质中的酶催化 酶在超临界流体中进行的催化反应。 超临界流体是指温度和压力超过某物质超临界点的流 体。 6.1.4 离子液介质中的酶催化 在离子液中进行的催化作用。 离子液（ ionic liquids ）是由有机阳离子与有机（无机） 阴离子构成的，在室温条件下呈液态的低熔点盐类，挥发 性低、稳定性好。 6.2 有机介质中水和有机溶剂对酶催化反应的影响 6.2.1 有机介质反应体系 （ 1 ）微水介质体系 ( 含水量一 般小于 2%) 酶以 冻干粉 或 固定化酶 的形式 悬 浮于有机溶剂 中，在悬浮状态下 进行反应 。 （ 4 ）胶束体系 （ 5 ）反胶束体系 反相胶束与生物膜有相似之处适用于生物膜表面 或与膜结合的酶的结构、催化特性和动力学性质 研究 。（酶被限制在含水的微环境中，而底物和 产物可以自由进出胶束）看图正、反胶束体系 “ 钢性”与”柔性”的动态平衡（维持酶催化活性 ） “紧密”：酶分子内的氢键 “开启”：酶分子间的氢键 ? a ．不同酶需水量不同 ? b. 同一种酶在不同有机溶剂中需水量不同 溶剂疏水性越强，需水量越少 刚性：生物大分子结构的精确性 柔性：生物大分子局部区域具有一定的可运动性。 6.2.2 水对有机介质中酶催化的影响 生物催化剂 必需水层 （ 1 ）必需水（ essential water ）： 紧紧吸附在酶分子表 面，维持酶催化活性所必 需的 最少 量水。 ? （ 1 ） 与酶分子表面带电基团结合达到 0-0.07g/g （水 / 酶）： 一个酶分子周围有 0-60 个水分子，蛋白质自由度无，酶活无 ? （ 2 ） 与表面的极性基团结合 (0.07-0.25g/g) ：一个酶分子周 围有 60-220 个水分子，蛋白质自由度上升，显示出酶活 ? （ 3 ） 凝聚到表面相互作用较弱的部位（ 0.25~0.38g/g ）： 一个酶分子周围有 220-300 个水分子，蛋白质自由度上升， 最大酶活 ? （ 4 ） 酶分子表面完全水化，被一层水分子覆盖。：酶分子 周围的水分子达到 300 以上，酶活降低，自由度最大 干燥的酶水合过程： 有机溶剂的极性 lg P —— 极性参数 P ：溶剂在正辛烷与水两相中的分配系数 研究表明，有机溶剂的极性越强，越容易夺 取酶分子结合水，对酶活力的影响就越大。 用有机溶剂 极性参数 lg P 描述有机溶剂的 极性 与 酶活力 之间的关系 溶剂极性对酶活性影响的规律（ Laane 规律） lg P 性质 水中溶解度 /% (20℃) 对酶活性的影响 ≤ 2 极性溶剂 ＞ 0.4 容易使酶失活，较少使 用 ＞ 2 ，＜ 4 中等极性 0.04 ～ 0.4 酶的活性难以预测，小 心使用。可以表现酶活 ≥ 4 非极性 ＜ 0.04 不会引起酶的变性，能 保持酶的高活性 （ 1 ）有机溶剂对酶 必需水 的影响 ? 极性弱的溶剂： 影响小 ? 极性强的溶剂： 夺取酶必需水 ? 疏水性溶剂： 不易溶解吸附酶必需水 ? 酶的失水与溶剂的 极性参数 （ lg P ）和 介电常数 （ ε ）相关，与系统中 底物的极性、底物浓度 和 含水量 均有关系 P S ? 催化过程： ? S→E -S → E- P→P （水相反应） ? S→water shell→E -S → E- P→P→organic phase （非水介质） ? 主要推动力： ? 底物 - 酶之间的结合能 Organic Solvent E-S E-P 底物分子 必须先进入酶分子的 必需水层 ，再进入到酶活性中心完成催化 过程， 产物 同