微生物计数检查（平皿法）PPT.pdf

药物分析 微生物限度检查 ——微生物计数检查（平皿法） 目录 第一节 微生物限度检查法的概念 第二节 微生物计数检查法 重点难点 掌握 微生物限度检查法的概念、微生物计数检查方法 熟悉 检查意义 了解 培养基的适用性检查 第一节 微生物限度检查法的概念 1. 概念 微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料、内包装材料 受微生物污染程度的方法。检查项目包括微生物计数检查（需氧菌总数、霉 菌和酵母菌总数）及控制菌检查。 2. 意义 ●保证药品质量，保障人民的用药安全 ●评价药品生产过程的卫生状况 第二节 微生物计数检查法 1. 试验前准备 （1）取样 ●检验量 一般供试品检验量为10g或10ml ●抽样量 应从2个以上最小包装单位中抽取供试品 （2）无菌室的清洁与消毒 （3）试验物品的准备 设备、器材、培养基、稀释液等 2. 试验过程 计数方法包括平皿法、薄膜过滤法和最可能数法（MostProbable- Number Method，MPN法）。采用任何一种方法，都需要先进行计数培 养基适用性检查和计数方法适用性试验，然后再进行供试品的检查。 （1）平皿法的操作流程图 供试品 1:10 2个平皿 10g或 稀释液 供试 1ml/皿 30~35℃ 培养 3~5天 分别注入 2个平皿 胰酪大豆胨琼脂培养基 10ml 液 计数 15-20ml/皿 1ml 结果报告 2个平皿 1ml/皿 15-20ml/皿 9ml稀释液 1:100 2个平皿 计数 供试液 分别注入 沙氏葡萄糖琼脂培养基 20~25℃ 培养 5~7天 用稀释液代替供试液同法操作进行阴性对照试验 （2）平皿法的报告规则 需氧菌总数测定宜选取平均菌落数小于300cfu的稀释级、霉菌和酵母菌总 数测定宜选取平均菌落数小于100cfu的稀释级，作为菌数报告的依据。取最髙 2 的平均菌落数，计算lg、lml或10cm 供试品中所含的微生物数，取4位有效数字 报告。如各稀释级的平板均无菌落生长，或仅最低稀释级的平板有菌落生长， 但平均菌落数小于1时，以＜1乘以最低稀释倍数的值报告菌数。 （3）结果判断 需氧菌总数是胰酪大豆胨琼脂培养基上生长的菌落数（包括真菌菌落数） ；霉菌和酵母菌总数是指沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的菌落数（包括细菌菌 落数）。按照如下标准判断： 101 cfu ：可接受的最大菌数为20 ； 2 10 cfu ：可接受的最大菌数为200 ； 103 cfu ：可接受的最大菌数为2000 ，依此类推。 若供试品的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数的检査结果均符合该品种项下 的规定，判供试品符合规定；若其中任何一项不符合该品种项下的规定，判供 试品不符合规定。 小结 微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及