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第一章 绪论
DNA 重组技术和基因工程技术。
DNA 重组技术又称基因工程技术,目的是将不同DNA 片段(基因或基因的一部分)按照
人们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体
细胞的新的遗传性状。
DNA 重组技术是核酸化学、蛋白质化学、酶工程及微生物学、遗传学、细胞学长期深入研
究的结晶,而限制性内切酶DNA 连接酶及其他工具酶的发现与应用则是这一技术得以建立
的关键。
DNA 重组技术有着广泛的应用前景。首先,DNA 重组技术可以用于大量生产某些在正常细
胞代谢中产量很低的多肽,如激素、抗生素、酶类及抗体,提高产量,降低成本。其次,
DNA 重组技术可以用于定向改造某些生物的基因结构,使他们所具有的特殊经济价值或功
能成百上千倍的提高。
请简述现代分子生物学的研究内容。
1、DNA 重组技术(基因工程)
2 、基因表达调控(核酸生物学)
3、生物大分子结构功能(结构分子生物学)
4 、基因组、功能基因组与生物信息学研究
第二章 遗传的物质基础及基因与基因组结构
核小体、DNA 的半保留复制、转座子。
核小体是染色质的基本结构单位。是由H2A 、H2B 、H3 、H4 各两分子生成八聚体和由大约
200bp 的DNA 构成的。核小体的形成是染色体中DNA 压缩的第一步。
DNA 在复制过程中,每条链分别作为模板合成新链,产生互补的两条链。这样新形成的两
个DNA 分子与原来DNA 分子的碱基顺序完全一样。因此,每个子代分子的一条链来自亲
代DNA ,另一条链则是新合成的,这种复制方式被称为DNA 的半保留复制。
转座子是存在染色体DNA 上的可自主复制和移位的基本单位。转座子分为两大类:插入序
列和复合型转座子。
DNA 的一、二、三级结构特征。
DNA 的一级结构是指4 种脱氧核苷酸的连接及其排列顺序,表示了该DNA 分子的化学构
成。
DNA 的二级结构是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。分为左手螺旋和
右手螺旋。
DNA 的高级结构是指DNA 双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。超螺旋结构是
DNA 高级结构的主要形式,可分为正超螺旋与负超螺旋两大类。
DNA 复制通常采取哪些方式?
1、线性DNA 双链的复制:复制经过起始、延伸、终止和分离三个阶段。复制是从5’端向3’
端移动,前导链的合成是连续的,后随链通过冈崎片段连接成完整链。
2 、环状DNA 双链的复制
(1) θ型:是一种双向复制方式。复制的起始点涉及DNA 的结旋和松开,形成两个方向相
反的复制叉,复制从定点开始双向等速进行。
(2) 滚环型:是单向复制的一种特殊方式,发生在噬菌体DNA 和细菌质粒上,首先对正链
原点进行专一性的切割,形成的5’端被单链结合蛋白所覆盖,3’端在DNA 聚合酶的作用下
不断延伸。
(3) D-环复制:也是单向复制的一种方式。是在线粒体DNA 中发现的。两条链的合成是高
度不对称的,最初只以一条母链为模版合成,迅速合成互补的新链,另一条则成为游离的单
1
链环(即D 环)。
真核生物DNA 的复制在哪些水平上受到调控?
1、细胞生活周期水平调控:决定细胞停留在G1 期还是进入S 期。
2 、染色体水平调控:决定不同染色体或同一染色体不同部位的复制子按一定顺序在S 期起
始复制。
3、复制子水平调控:决定复制的起始与否,并且是高度保守的。
DNA 修复包括哪几种?
1、错配修复:识别新合成链中的错配并加以校正,保证子链的正确性。
2 、切除修复
1)碱基切除修复:切除突变的碱基
2 )核苷酸切除修复:修复被破坏的DNA
3、DNA 直接修复:修复嘧啶二聚体或者甲基化DNA
第三章 生物信息的传递--RNA 转录与加工
定义:Pribnow box,编码链,上升突变,增强子。
在原核生物启动子被保护区内有一个由5 个核苷酸组成的保守序列TATATT ,是聚合酶结合
位点,称为Pribnow 区,其中央大约位于起点上游10bp 处,所以又称为–10 区。
在DNA 的两条链中与mRNA 序列相同的那条DNA 链是编码链或称有意义链。
如果增加Pribnow 区的共同序列,将乳糖操纵子的启动子中的TATGTT 变成TATATT ,就会
提高启动子的效率,称为上升突变。
在一些转录单元上发现其转录起始位点上游约200bp 处有两段7
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