朊病毒感染后神经细胞分泌tau蛋白含量变化的研究.pdfVIP

摘要 摘 要 朊病毒病是一类潜伏期长，可影响多种哺乳动物包括人类的神经退行性疾病，死亡率 100% Tau 为 。 蛋白作为一种胞内微管相关蛋白，在多种神经退行性疾病患者脑脊液中显著 tau 升高。近年来研究显示神经细胞和非神经细胞能够特异性分泌 蛋白。这些研究提示患 tau tau 有神经退行性疾病后，细胞可能存在 蛋白的非常规分泌。但在朊病毒疾病中 蛋白的 分泌情况还未有报道。 tau SMB-S15 为了探究朊病毒感染后总 蛋白的分泌情况，利用朊病毒感染的 细胞和其 对照细胞系SMB-PS，通过ELISA 和Western blot 方法检测了细胞裂解液和培养液中总tau ELISA SMB-PS SMB-S15 tau 蛋白含量。 结果显示与 细胞相比， 细胞培养液中总 蛋白含量 Western blot SMB-PS SMB-S15 tau 显著升高。 结果显示与 相比， 细胞裂解液中总 蛋白含量 SMB-PS SMB-S15 tau 显著升高； 和 细胞培养液中均存在总 蛋白阳性条带，经与裂解液中 tau SMB-S15 tau SMB-PS 总 蛋白归一化后， 细胞培养液中总 蛋白含量显著高于 细胞，再 ELISA tau 2 10 次印证 结果。本研究自行制备了四支抗 蛋白外显子 和 的单克隆抗体 anti-tE2/ 10 （ ），并在与抗原结合能力、种属反应性、对朊病毒模型的适应性方面对其进 行验证。本研究将制备的单抗应用到ELISA 方法中，检测了SMB-PS 和SMB-S15 细胞培 tau SMB-PS SMB-S15 E2/E 10-tau 养液中相应 异构体的含量。结果显示 和 细胞均能够分泌 ， tau 但是含量均无明显差异。为了探究磷酸化对朊病毒感染的神经细胞分泌 蛋白能力的影 Western blot SMB-PS SMB-S15 Thr 181 Thr205 Ser396 响，通过 实验检测了 和 细胞培养液中 、 、 Ser404 tau pT 181/pT205/pS396/pS404-tau 和 位磷酸化的 蛋 白 （ ）水平。结果显示 pT205/pS396-tau SMB-PS SMB-S15 SMB-S15 在 和