分子生物学7-核酸分子杂交.pptxVIP

;核酸分子杂交（nucleic acid molecular hybridization）;核酸分子杂交技术; 核酸探针( probe )：带有可检测标记的已知序列的互补DNA或RNA片段。通常用核素或非核素示踪标记。;第一节 核酸分子杂交的基本原理 第二节 核酸探针 第三节 核酸分子杂交技术;第一节 核酸分子杂交的基本原理;一、变性（denaturation）;变性的因素;3.常用变性方法(1)热变性;热变性;(2)酸碱变性;(3)化学试剂变性;二、复性（renaturation）; 单链核酸的起始浓度 核酸链长度（分子量） 核酸分子的复杂性，即核酸分子中不同序列的总长度 温度 离子强度;三、杂交（hybridization）;杂交温度：;实际的杂交反应中，水溶液：杂交反应温度为68℃ 50%甲酰胺溶液：杂交反应温度为42℃;变性、复性、杂交示意图;四、预杂交（prehybridization）; 第二节 核酸探针;按化学本质分：DNA探针 RNA探针;双链探针：包括基因组DNA探针和cDNA探针 基因组DNA探针：由基因组文库筛选…标记 cDNA探针：由cDNA文库筛选…标记或者经RT- PCR