中长链脂肪酸甘油三酯的酶法制备技术研究.pdf

符号说 明 AR:AnalyticalGrade,分析纯 Cy:CaplylicAcid, 辛酸 DHA:DocosahexaenoicAcid,二十二碳六烯酸 DAG:Diacylglycerol,甘油二酯 EPA:EicosapentaenoicAcid,二十碳五烯酸 ECI:Electrospray Interface, 电喷雾接口 ELSD:Evaporation Light ScatteringDetector,蒸发光散射检测器 FFA:FreeFattyAcid,游离脂肪酸 GC:GasChromatography,气相色谱法 HPLC:High PerformanceLiquid Chromatography, 高效液相检测 LCFA/L:Long-Chain FattyAcid,长链脂肪酸 LCT:Long-Chain Triglyceride,长链甘三酯 MCFA/M:Medium-Chain FattyAcid, 中链脂肪酸 MAG:Monoglycerides,单甘酯 MS:Mass Spectrometry,质谱检测器 MCT:Medium-ChainTriglyceride, 中链甘三酯 MLCT:Medium-AndLong-Chain Triglyceride, 中长链甘三酯 MUFA:MonounsaturatedFattyAcid,单不饱和脂肪酸 PUFA:PolyunsaturatedFattyAcid, 多不饱和脂肪酸 SLs:StructuredLipids, 结构脂质 SCFA/S:Short-ChainFattyAcid,短链脂肪酸 SFA:SaturatedFattyAcid,饱和脂肪酸 TG:Triglyceride,甘油三酯 TLC:Thin-Layer Chromatography,薄层色谱法 TAG:Triglyceride,甘油三酯 UPLC:Ultra-PerformanceLiquidChromatography,超高效液相检测 目 录 中文摘要I AbstractIII 1前言1 1.1结构脂简述1 1.1.2 结构脂质在人体内的代谢途径1 1.1.3 结构脂质的生理功能2 1.1.4 结构脂质的研究现状3 1.2 高油酸花生油简介4 1.3 结构脂质的合成方法4 1.3.1直接酯化法5 1.3.2 酯交换法5 1.3.3酸解法6 1.3.4 两步酶法7 1.4 结构脂的分离纯化与检测分析7 1.4.1结构脂的分离纯化7 1.4.2 结构脂的检测分析9 1.5本课题研究意义及主要内容9 1.5.1研究意义9 1.5.2 研究内容10 2材料与方法11 2.1实验材料与仪器11 2.1.1实验原料与试剂11 2.1.2 实验材料12 2.1.3实验仪器12 2.2 实验方法13 2.2.1高油酸花生油脂肪酸分析13 2.2.1.1 甲酯化方法13 2.2.1.2 脂肪酸甲酯色谱检测条件13 2.2.2 Sn-2位脂肪酸的测定13 2.2.3 结构脂质的制备工艺研究14 2.2.3.1高油酸花生油与辛酸的酸解反应14 2.2.3.2 反应产物的分离纯化14 2.2.3.3 甲酯化处理15 2.2.3.4 脂肪酸甲酯色谱检测条件15 2.2.3.5 辛酸插入率的分析方法15 2.2.3.6酰基供体与催化用酶的选择15 2.2.3.7酸解法合成MLCT单因素试验16 2.2.3.8酸解法合成MLCT 响应面优化试验17 2.2.3.9结构脂质的纯化17 2.2.3.10尿素包合纯化后结构脂质纯度的测定方法17 2.3 酶的回收及操作稳定性考察18 2.4 结构脂质的理化性质检测18 2.4.1物理混合油的制备18 2.4.2 物理混合油和结构脂质脂肪酸组成和含量的测定18 2.4.3物理混合油和结构脂质Sn-2位脂肪酸组成18 2.4.4 高油酸花生油和结构脂质的理化性质检测方法18 3 结果与分析21 3.1高油酸花生油脂肪酸组成分析21 3.1.1高油酸花生油总脂肪酸组成和含量21 3.1.2 高油酸花生油的Sn-2位脂肪酸组成和含量22 3.2 无溶剂体系酶法催化制备结构脂23 3.2.1催化用酶的选择23 3.2.2结构脂质酶法合成单因素试验结果分析24 3.2.2.1反应时间24 3.2.