冷冻电镜精编版.ppt

冷冻电镜的发明及其在生物学的应用 报告人:XX  冷冻电镜是什么? 冷冻电子显微镜技术(ryo electron microscopy)简称 冷冻电镜:应用冷冻固定技术,低 温下使用透射电子显微镜观察样品的 显微技术,从而得到生物大分子的结 构  我们或许在不久的将来就能获得生命复杂 机制的原子级分辨率的图片了  ◆冷冻电镜技术获2017诺贝尔化学奖 2017年10月4日下午5点45分许,诺贝尔奖评委会主席格荣·汉森 ( Goran hansson)宣布,因发明用于生物分子的高分辨率结构测 定的冷冻电子显微镜( (cryo-electron microscopy),瑞士洛桑大 学的雅克·杜波切特( Jacques Dubochet)、美国哥伦比亚大学的 乔基姆·弗兰克( Joach im Frank)和英国剑桥大学的理查德·亨 德森( Richard Henderson)获得2017年度诺贝尔化学奖 ●诺贝尔奖官方称为“使得生物化学进入一个新时代”  The Nobel Prize in Chemistry 2017 Nobelpriset i kemi 2017 KADEMIEN Jacques Dubochet Joachim Frank Richard Henderson Switzerland York, USA Molecular Biolo tor ubveckling av kryoeiektronrmiroskopi for hoguppidsande strulturbest  ■冷冻电镜产生背景 ●上世纪50年代,利用X射线成像技术解析蛋白质结枸,人们 才首次得以拍出蛋白质晶体的螺旋状结构图片。 ●X射线晶体学是最早用于结构解析的实验方法之一。其中关 键步骤之一即是,为获得可供X射线衍射的单晶,需要将纯 化后的生物样品进行晶体生长。现实情况却是,目前很多 复杂的大分子物质难以获得晶体。 彼得阿格雷(美)和罗德里克麦金农(美)对细胞 膜中的水通道的发现以及对离子通道的研究, 共同分享了2003年的诺贝尔化学奖。  Ⅹ射线单晶衍射技术的原理 当一束X射线照射到晶体上时,X射线在晶体中产生衍 射现象。晶体所产生的衍射花样都反映出晶体内部的原子 分布规律。 X射线源 单品体 多晶 非晶体 好文档这好友到x  ●上世纪80年代初,核磁共振成像技术问世,人们得以对溶液中 和固态的蛋白质进行成像研究,不仅进一步认识了蛋白质的结 构,更获得了蛋白质如何运动及与其他分子相互作用的基本了 解 记录仪 讨频震荡哥 试样管 射频接 永 永久 磁铁 /m/∈次[s 磁铁 扫场线圖 扫场线圈 核磁共振仪原理示意图  核磁共振技术的优点:缺点:所能测定的样品的分子量要比较小 具有高分辨率,仅次于一般在50KD以下。另外核磁头振衍射技 Ⅹ-射线晶体学技术,术的反应体系是溶液,这对不溶的蛋白比 可以在溶液中操作,在较困难,如膜蛋白,只有用去垢剂才能溶 近似蛋白质生理环境下解,这就使研究复杂化。在核磁共振衍射 测定其结构,甚至可以的观察中,去垢剂会造成很大的柴音和假 对活细胞中的蛋白质进相。实验周期较长,采用核磁共振方法寻 行分析,获得“活”的找蛋白质结构较为耗费人力及时间,尤其 蛋白质结构。 是图谱分析工作极为困难和费时。 被认为比晶体结构更能够描述生物大分子在细胞内的真实结构,并且能获得氢原 子的结构位置。缺点则在于蛋白质在溶液中往往结构不稳定而难得获取稳定的信