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人源化单克隆抗体 By hyglix group 人源化单克隆抗体是什 么？ 分类方法： 人源化抗体就是指抗体 的可变区部分（即 Vh 和 Vl 区）或抗体 所有全部由人类抗体基因所编码。人 源化抗体可以大大减少异源抗体对人 类机体造成的免疫副反应人源化抗体 包括嵌合抗体、移植抗体和全人源化 抗体等几类。 基因工程抗体 ? 目的：保留抗体的抗原结合能力、易于大 规模生产、减小鼠源性成分，增加人源化， 可用于临床。 ? 基本原理：借助于基因工程手段，将编码 Ab 的重轻链可变区基因重组到真核或原核 表达载体上并进行表达。 国外市场情况： ? 单克隆抗体， 90 年代后期上市以来，经过 多年的开发，终于在某些疾病的治疗上取 得突破。抗体进入临床研究，其中 16 个已 进入市场， 2002 年销售额达 29 亿美元，预 计 2005 年将达近 90 亿美元。 ? 根据商业通讯公司预测， 2002 年全球治疗 与诊断用抗体市场为 73 亿美元，预计将以 每年 16.6% 的平均速度增长，到 2007 年可达 到 157 亿美元。 2001 年诊断用抗体市场为 4.41 亿美元。 人源化单克隆抗体的临床应用 ? 在肿瘤治疗方面的应用 ? 在器官移植中的应用 ? 在自身免疫性疾病方面的应用 未来发展方向 目前，抗体人源化方法还在不断发展和晚 上，目标是提高抗体亲和力、降低抗体异 原性，同时兼顾抗体的免疫活化作用。另 外，针对不同的异源抗体。选择合适的人 源化途径构建更适合于临床应用的人源化 抗体，将为新药的开发和一些顽固的治疗 开辟新的途径。 恒定区人源 化 可变区人源 化 利用抗体库技 术获得完全人 源序列 发展 嵌合抗体 ? 选择或剪切效 应基因 ? 减少了 HAMS ? …… CDR 移植 Ab 1 、模板替换 2 、表面重塑 3 、补偿变换 4 、定位保留 全人源化抗体 恒定区人源化 -- 鼠 / 人嵌合抗体 （ chimeric antibody ） 表达产物 —— 嵌合抗体的纯化 以 A 蛋白包被的小珠通过吸附和解吸过 程来纯化抗体 , 这种 A 蛋白可牢固地结合于免 疫球蛋白重链 Fc 段第二和第三恒定区。 并非所有免疫球蛋白对 A 蛋白的亲和力都 相同 在纯化抗体前 , 必须采用商品化的抗 Fc 段 同种型免疫学试剂先行测定其重链所属的类 型 , 如抗体属于对 A 蛋白亲和力弱的一类 ( 如 人的 IgG3) , 就必须使用其他方法。 嵌合抗体检测 Western 印迹法是检测抗体的常用方法。此 种技术是把电泳分离的蛋白组分从凝胶转移至 一种固相支持体 , 并以针对特定的氨基酸序列的 特异性试剂检测之。对于嵌合抗体来说 , 通常使 用的探针为抗体。 完全人源性单克隆抗体 1 ，筛肿瘤特异性抗原： （ 1 ）利用 T 细胞筛内源性抗原 （ 2 ）利用 Hu-PBL-SciD 小鼠筛抗体结合抗原 , 2 ，抗体制备及构建抗体库技术： （ 1 ）合成抗体库技术及小鼠转基因技术 （ 2 ）核糖体展示技术 （ 3 ）噬菌体抗体库技术 3 ，筛选技术及表达 （ 1 ）亲和筛选（ immobilized panning) （ 2 ）捕获法 (capture panning ) （ 3 ）完整细胞淘洗 (whole cell panning ) 筛选肿瘤抗原 1 ，利用 T 细胞筛选抗原 Pre-T 细胞 混合培养以诱导 CTL CTL 细胞 肿瘤细胞 杀伤与否 CDNA 文库 转染的细胞 2 ， SCID 小鼠筛选抗原 SCID 小鼠 肿瘤细胞