第六章转基因动物.pptVIP

第六章 转基因动物;本章目录;转基因动物的概念;;;第一节 动物转基因技术;一. 显微注射法;;1、目的DNA的准备;2、小鼠的准备和要求;3、受精卵的分离;4、显微注射;首只转基因猴安迪和制备它的卵母细胞;转基因果蝇的制作;5、受精卵的移植;6、转基因小鼠的鉴定;标记性状鉴定转基因果蝇;显微注射法的效率;影响转基因动物成功的关键制约因素是什么？;提高目的DNA的整合率与表达率;7、 显微注射法的不足;（1）逆转录病毒的结构;（2）逆转录病毒的基因组;(3) 逆转录病毒的生活周期 ;受体 吞噬 脱外壳 逆转录 核蛋白复合体 有丝分裂 复合体进入核 ;病毒DNA－蛋白复合体中含有由一个病毒DNA的pol基因所编码的内切酶，在此酶的作用下，宿主染色体被切开，而病毒的染色体得以嵌入。此过程发生在细胞有丝分裂的S期。 嵌入后的前病毒被细胞的RNA聚合酶II转录为病毒RNA，其蛋白质表达完全依赖于细胞的蛋白质合成机构。;(4) 逆转录病毒载体的构建 ;;（5）逆转录病毒介导转基因的优势;（6）逆转录病毒的安全性问题 ;三. 胚胎干细胞法;（1）利用ES细胞制备转基因小鼠 ;;;胚胎干细胞介导转基因动物的产生;;（2）利用ES细胞进行基因敲除;基因敲除的步骤;;正负筛选法;;四. 精子载体法;精子吸附外源的DNA 方法;五. 体细胞核移植法 ;1997年，英国罗斯林研究所的Wilmu