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固定化酶和固定化细胞
固定化酶的定义
令所谓固定化酶( mobilized enzyme),是指在一定的
空间范围内起催化作用,并能反复和连续使用的
酶
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酶固定化技术发展史
今1916年, Nelson和Gi发现酶的固定化现象;
◇1969年,千畑一郎等将固定化氨基酰化酶应用于
生产L氨基酸,开创了固定化酶应用于工业生产
的先例
◆1971年召开的第一届国际酶工程会议上,建议采
用统一的英文名称 immobilized Enzyme;
☆1973年,固定化大肠杆菌菌体中的天冬氨酸酶连
续生产L天冬氨酸。
◇1986年,利用固定化原生质体发酵生产碱性磷酸
酶和葡萄糖氧化酶等相继获得成功。
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发展现状
心从目前的发展状况来看,尽管酶种类繁多,但已
经固定化的酶却相对有限,采用固定化酶技术大
规模生产的企业尚属少数,真正在工业上使用的
固定化酶还仅限于葡萄糖异构酶、葡萄糖氧化酶
和青霉素酰化酶等为数不多的十几个酶种,故仍
需大力研究开发使更多的固定化酶和细胞能适用
于工业规模生产。
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固定化酶的优点
同一批固定化酶能在工艺流程中重复多次地使用;
固定化后,和反应物分开,有利于控制生产过程,
同时也省去了热处理使酶失活的步骤;
稳定性显著提高;
可长期使用,并可预测衰变的速度
提供了研究酶动力学的良好模型。
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固定化酶的制备原则
☆(1)必须注意维持酶的构象,特别是活性中心的构象。
(2)酶与载体必须有一定的结合程度。酶的固定化既不影
响酶的原有构象,又能使固定化酶能有效回收贮藏,利于反
复使用。
◆(3)固定化应有利于自动化、机械化操作。这要求用于固
定化的载体必须有一定的机械强度,才能使之在制备过程中
不易破坏或受损
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◆(4)固定化酶应有最小的空间位阻。
◆(5)固定化酶应有最大的稳定性。在应用过程中,
所选载体应不和底物、产物或反应液发生化学反
应。
(6)固定化酶的成本适中。
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固定化酶(细胞)的制备方法
酶和细胞固定化方法
载体结合法交联法
包埋法
网格型微囊型
物理吸附法离子结合法共价结合法热处理(细胞)
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吸附法
共价结合法
①|c
交联法
网格型
微胶囊型
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1、吸附法
通过载体表面和酶分子表面间的次级键相互作用
而达到固定目的的方法,是固定化中最简单的方
法
◆吸附法又可分为物理吸附法和离子吸附法。
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