动物繁育技术 精液稀释、精液保存 精液的稀释与保存.ppt

精液的稀释与保存 娄底职业技术学院 李继仁 课时教学计划 教学目标：使学生了解精液稀释液配制及精液稀释的方法。了解精液保存的三种方法。 教学内容：1）精液稀释；2）精液的保存 教学重点：稀释液配制与稀释方法；猪精液的常温保存；牛精液的冷冻保存。 教学难点：稀释倍数的计算；冷冻保存精液的原理 教学方法：讲授与讨论、播放视频 带着问题学 精液稀释液的成分有哪几类？各有什么作用？ 配制精液稀释液的水，要使用什么样的水？ 配制精液稀释液的药品可以用工业纯吗？ 精液稀释液中加入卵黄，起什么作用？ 精液稀释时是将精液倒入稀释液中吗？ 精液常温保存的温度是多少？低温保存的温度是多少？ 低温保存时是要快速降温还是要缓慢降温？为什么？ 冷冻保存精液的稀释液为什么要加入甘油？稀释后为什么要放置2~4小时后再冻结？ 液氮有哪些理化特性？液氮罐的使用要注意哪些问题？ 5.4 精液稀释 精液稀释是向精液中加入适宜于精子存活的稀释液。 精液稀释的目的有两个： 1）扩大精液容量，从而增加输精头数，提高公畜利用率； 2）延长精子的保存时间及受精能力，便于精液的运输，使精液得以充分利用。 稀释倍数计算： 精液稀释倍数=原精液的精子密度×输精剂量×输精时精子活率/输精要求的有效精子数。 分装袋（支）数=采精量×稀释倍数÷输精剂量 例：有一头种公猪，一次采得鲜精200 ml，经检查精子的活力为0.8，精子的密度为2亿，预计在2天内输精，保存后活力不低于0.6，输精剂量为每袋80 ml，要求输精时有效精子数不少于20亿个。问：本次采得的精液能稀释多少倍，能分装多少袋？ 稀释倍数=2×0.6×80÷20=4.8（倍） 分装袋数=200×4.8÷80=12（袋） 稀释液和精液的温度必须调整一致 将稀释液沿精液瓶缓慢倒入精液中 5.5 精液保存 精液保存的目的是为了延长精子的存活时间，便于运输，扩大精液的使用范围。 现行精液保存的方法按保存的温度分为三种。 常温保存（15~25℃） 低温保存（0~5℃） 冷冻保存（-79~-196℃） 前两者保存温度都在0℃以上，以液态形式短期保存，故称液态精液保存。后者以冻结形式作长期保存，故称冷冻精液保存，牛的冷冻精液在生产中被广泛应用。 猪的精液常温保存原理与稀释液配制技术 猪的精液稀释与保存 3）液氮容器 液氮容器用于贮存冷冻精液和贮存、运输液氮。液氮容器分为开放式和密闭式两种。在制作和贮存冷冻精液中常用开放式液氮容器。液氮罐有大中小不同的规格。液氮罐结构包括：?外壳、内槽、真空夹层、颈管、盖塞、提简、外套。液氮罐应该具有绝热性能好、坚固耐用、使用方便等特点。使用中要防止撞击、倾倒、定期刷洗保养。 液氮罐的构造 液氮罐的构造 液氮及液氮罐的使用 冷冻精液制作 9）冷冻精液的取用 在分发、转移、取用冷冻精液时，应在5L广口液氮罐或其他小容器的液氮中进行。 提筒不能提出液氮罐口。操作者最好带上手套防冻，用浸过液氮的长柄镊子快速取出冷冻精液。精液分次脱离液氮时间不得超过5s。 提筒不能提出液氮罐口 冷冻精液保存和取用 复习思考题 精液稀释液的主要成分有哪些？各有何作用？ 常温保存精液的原理是什么？常温保存精液要注意什么？ 冷冻保存精液的原理是什么？ 液氮罐使用有哪些注意事项？ 有一头种公牛，一次采得鲜精13ml，经检查精子的活力为0.8，精子的密度为12亿。此精液处理后全部用于细管冷冻，预计解冻后活力为0.3，每只细管的容量为0.25，其有效精子数要求不少于1500万。问：本次采得的精液能稀释多少倍？能制作多少支细管精液？ 5）冷冻保存稀释液 冷冻精液稀挥液的成分一般应含有低温保护剂（卵黄、奶液）、抗冻保护剂（甘油等）、维持渗透压物质（糖类、柠檬酸钠）、抗生素及其他添加剂。 冷冻精液的稀释液根据配制要求和稀释的需要，将其分别配制，以便于使用。冷冻精液的稀释液见教材。 ①基础液 将糖类、盐类等可通过高温消毒的药品，成批量地配制成溶液，用瓶装密封保存。 ② I液 根据每次采精所需要的稀释液虽，在基础液中加入一定量的卵黄和抗冷剂等配制成I液，用作精液的第一次稀释。 ③ Ⅱ液 取需要量的I液，按照比例加入经灭菌处理的甘油等冷冻保护剂，配制成含甘油的Ⅱ液，用作精液的第二次稀释。 6）冷冻精液制作步骤（以细管冷冻精液为例） ①精液品质检查，活率达0.7以上。 ②等温Ⅰ液初步稀释（稀释倍数为终倍数一半）。 ③纱布包裹放冰箱冷藏室经1~1.5h缓慢降温至0~5℃。 ④用Ⅱ液进行等体积等温度（0~5℃）稀释。 ⑤在原温度环境下放置2～4h，使甘油充分渗透进入精子体内（平衡）。 ⑥以长为25～133 mm，存量为0.25或0.5m1的各种颜色的聚氯乙烯复合塑料细管，通过吸引装置将平衡后的精液进行分装，用聚乙烯醇粉末、钢珠或超声波静电压封