乙肝病毒DNA的试验室检测.pptVIP

LOREM IPSUM DOLOR 乙肝病毒 DNA 的实验室检测 袁立云 1 、荧光定量 PCR 技术 2 、乙肝病毒的感染 3 、 HBV-DNA 与临床 荧光定量 PCR 技术 荧光定量 PCR 技术 ? Polymerase chain reaction(PCR) ，聚合酶链式反应，是 一种 DNA 的快速扩增技术。 PCR 技术通过两个短的称为引物 的 DNA 小片段和一种耐热酶（ TaqDNA 聚合酶）的作用，经 过 高温变性、低温退火、适温延伸 三个步骤在 3 个小时内 反复循环 25-30 次，把特定的 DNA 片段扩增 1000 万倍。 ? 每个 PCR 体系含 4 种主要成分： 含有待扩增序列的 DNA 模板 、引物、 TaqDNA 聚合酶、脱氧核糖核酸三磷酸（ dNTP ） 实时荧光定量 PCR 技术，是指在反应体系中加入 荧光 标记 ，利用荧光信号积累实时检测整个 PCR 过程，通过 标准曲线 对 PCR 终产物的分析，最终实现对未知的起始 模版进行定量分析的一种技术，是迄今对已知基因序列的 核酸测定中最灵敏的方法。 荧光定量 PCR 技术 PCR 反应过程 5 5 3 3 d . NTPs Taq 酶 Primers 反应组分 变 性 延 伸 5 3 5 3 3 5 3 Taq Taq 重 复 退 火 5 3 3 3 3 5 3 3 5 3 3 循环