柠檬酸发酵机制详解.pptVIP

柠檬酸发酵机制 重点:柠檬酸生物合成途径;柠檬酸生物 成的代谢调节机制。 难点:柠檬酸生物合成的代谢调节机制。 第一节概述 柠檬酸简介 柠檬酸又名枸櫞酸,学名ω-羟基丙烷三羧酸,是 生物体主要代谢产物之一。化学名称2羟基丙三 羧酸,英文文献俗名 citric acid,分子式CH3On 无色或白色晶体,无臭,味极酸,易溶于水和乙 醇、微溶于乙醚、水溶液呈酸性反应 CH2-COOH HO-C-COOH CH2-COOH 、柠檬酸及其盐的应用概况 食品工业:酸味剂、增溶剂、抗氧化剂,除腥脱 臭剂; 医药工业: 化学工业 美容品、化妆品 、我国柠檬酸生产现状 生产状况:60年代开始,生产柠檬酸年总产量居世界 第一,出口量一直占国内总产量的50%以上。目前,生产 厂家近百家,万吨级以上的有6家。主要有安徽丰原生物 化学集团公司(生产能力为120万吨/年)、江苏无锡罗氏 中亚柠檬酸有限公司(生产能力为40万吨/年)、安徽华 源生物药业有限公司(生产能力为35万吨/)等。 存在问题:出口量增长过快,技术创新相对滞后,加 上国际市场竞争激烈,已出现严重的供大于求的局面,设 备利用率不到60%,行业经济效益呈滑坡态势 表1回和西 公司租生产能丈 国家公司名称生产能力 万吨生产品科 美国 A DN 5.0 佇檬酸,佇檬 酸钠 美国 M iles 美国 Cargill 柠檬酸 Pfizer 3.2柠檬酸 奥地利 Tangburzinner e.5-7 佇檬酸及钾、 比利时 Citrique belge 佇檬酸及钾、 钠盐 奠国 Baver CtK 柠檬酸及钠 檬酸皮钠 爱尔兰 A DM Ring 佇檬酸及钾、 钠盐 意大利 Bancor sPA.o-2.5铲檬酸及钠 第二节柠檬酸合成途径与代谢调控 柠檬酸合成途径的发现 1940年, Krebs:TCA 1953年, Jagnnathan证实黑曲霉中存在EMP途 径所有酶; 1954年,Shu提出葡萄糖80%经EMP途径代谢;, Ramakrishnan等发现黑曲霉中 存在TCA循环。 黑曲霉柠檬酸生物合成途径 淀 生长时 EMP/HMP*2:1 产殿时EM/HMP=4:1 烯式丙同驗 一乙駛 乙院CA 草最乙酸 拧祿配 积属柠键 头 富马酸 乙蓝戲 异拧嶂酸 珀酸 珀耽CA 女-虎二院 柠融积黑径 图23-3柠酸生物合成途径 黑曲霉利用糖类发酵生成柠檬酸其生物合成途径是,葡 萄糖经EMP、HMP途径降解生成丙酮酸,丙酮酸一方面氧化 脱羧生成乙酰CoA,另一方面经CO2固定化反应生成草酰乙 酸,草酰乙酸与乙酰CoA缩合生成柠檬酸 (1)生长期与产酸期都存在EMP与HMP途径,前者 EMP: HMP=2:1,后者 EMP: EMP=4:1 □2)黑曲霉柠檬酸产生菌中存在TCΔ循环与乙醛酸循环,在 以糖质原料发酵时,当柠檬酸积累时,TCA和乙醛酸循环 被阻断或减弱。 (3)由于TCA和乙醛酸循环被阻断或减弱,草酰乙酸是由 丙酮酸(PYR)或磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)羧化生成的。 即由两个CO2固定化反应体系,其中以丙酮酸羧化酶作用 下固定化CO2生成草酰乙酸为主。 柠檬酸生物合成的代谢调节机制 2、6二磷酸暴糖 乙酰C馬 白匠馈抑制 1马酸 G L }一 图23-6無曲霉铲酸积眾的代谢调节 (一)糖酵解及丙酮酸代谢的调节 1、磷酸果糖激酶(PFK) 腐物和力 抑制荆 F-6-P 柠敏tK;=1.25mmaL EC2,7,1.1I PEPI Jo.4=0. 25rmmov/L ATP〔浓度 Mn2浓度对磷酸果糖激酶的影响 艋高于窕足和离子缺乏下鼎曲歌PKK活力 柠慷酸/(mmo/L) 离干/(mmo/L Mn2+缺乏为何会使NH4浓度开高呢? 当培养基中Mn2+缺乏时,微生物体内积累几种氨基酸 (GA、GI、Arg、Oin等),这些氨基酸的积累,意味着 体内蛋白质的合成受阻,而外源蛋白质的分解速度则不受 到影响,这样NH的消耗下降,NH4浓度就会升高