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芽孢染色技术主讲：许子刚 食品营养与检测专业教学资源库 一 目录页芽孢染色的原理、意义二芽孢染色的基本程序三芽孢染色关键控制点 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 芽孢染色的原理、意义一1.芽孢染色的原理2.芽孢染色的意义 — 2 — 食品营养与检测专业教学资源库 芽孢染色的原理、意义芽孢染色技术1.芽孢染色的原理 芽孢染色法就是根据芽孢既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。用着色力强的染料外，还需要加热，以促进芽孢着色。 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 芽孢染色的原理、意义芽孢染色技术2.芽孢染色的意义（1）芽孢的有无、形态、大小和着生位置等是细菌分类和鉴定中的重要形态学指标；（2）是否能杀灭一些代表菌的芽孢是衡量和制定各种消毒灭菌标准的主要依据。 （3）芽孢对不良环境有很强的抵抗力，可以保持生命力达数十年之久，在自然界使细菌度过恶劣的环境，在实验室是保存菌种的好材料。 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 芽孢染色的基本程序二1.制片2.加热染色3.脱色4.复染5.镜检 — 2 — 食品营养与检测专业教学资源库 芽孢染色的基本程序芽孢染色技术1.制片涂片：取洁净载玻片，在中央滴一滴生理盐水，用接种环挑取菌体，涂成直径约1厘米极薄的菌膜。干燥；微热烘干或自然干燥,也可电吹风低温吹干。固定：涂面朝上，快速通过酒精灯火焰2—3次。 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 芽孢染色的基本程序芽孢染色技术2.加热染色3.脱色4.复染 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 芽孢染色的基本程序芽孢染色技术5.镜检涂片完全干燥后，先在低倍镜，然后在油镜下观察，菌体芽孢染色结果正确，细胞均匀分散。 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 芽孢染色关键控制点三1.芽孢染色成败关键2.芽孢染色注意事项 — 2 — 食品营养与检测专业教学资源库 芽孢染色关键控制点芽孢染色技术1.芽孢染色成败关键（1）供芽孢染色用的菌种应控制菌龄，使大部分芽孢仍保留在芽孢囊内。巨大芽孢杆菌在37℃条件下以培养12～24小时的效果最佳。（2）涂片不宜过厚； 火焰固定温度要适宜； 控制好脱色程度。 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 芽孢染色关键控制点芽孢染色技术2.芽孢染色注意事项（1）用改良法时，欲得到好的涂片，首先要制备浓稠的菌液，其次是从小试管中取染色的菌液时，应用接种环充分搅拌，然后再挑取菌液，否则菌体沉于管底，涂片时菌体太少。（2）加热过程中要及时补充染液，切勿沸腾或蒸干，防止加热过度。染液被蒸干时不能立即补加染液，否则载玻片炸裂。 — 1 — 谢谢