分子生物学 许晓东2.ppt

2.1 染色体;2.1.1 染色体概述;3;人类染色体显微结构图;5;DNA的分布;在分子生物学中，我们用“染色体DNA”，是为了区别质粒、线粒体和叶绿体DNA。 了解染色体，是为了了解DNA的存在状态，同时也是为了理解染色体水平的基因表达调控。 染色体本身也是分子生物学家的研究材料，比如针对端粒的研究。;大家学习辛苦了，还是要坚持;2.1.2 真核细胞染色体的组成;10;化学组成 (1). DNA：约占30%，每条染色体一个双链DNA分子 是遗传信息的载体，也就是所谓的遗传物质 (2). 蛋白质 组蛋白(histone)：呈碱性，结构稳定；与DNA结合形成、维持染色质结构，与DNA含量呈一定的比例 非组蛋白：种类和含量不稳定；作用还不完全清楚，可能与染色质结构调节有关，在DNA遗传信息的表达中有重要作用 (3). 少量的RNA（含量小于DNA含量的10%）;1. 蛋白质;13;组蛋白的特性 1. 进化上的极端保守性 特别是H3、H4，牛、猪、大鼠的H4完全相同，牛和豌豆的H4只有两个氨基酸的差异。 2. 无组织特异性 仅发现两个例外（鸟鱼两栖红细胞H1-H5，精细胞鱼精蛋白） 3. 肽链上氨基酸分布的不对称性 N端碱性氨基酸 C端疏水氨基酸 4. 组蛋白的修饰作用 甲基化、乙酰化、磷酸化、ADP核糖基化等 5. 富含赖氨酸的组蛋白H5 只存在于鸟类、两栖类等含有细胞核的红细胞中;15;16;肽链上氨基酸分布的不对称性 N端碱性氨基酸 C端疏水氨基酸;组蛋白的修饰作用——影响组蛋白与DNA的亲和性，调控基因表达。;非组蛋白（含量约为组蛋白的60-70%） 包括酶类和细胞分裂有关的蛋白（收缩蛋白、骨架蛋白、核孔复合物蛋白、肌动蛋白、肌球蛋白、微管蛋白、原肌蛋白） 高速泳动蛋白（high mobility group protein, HMG蛋白）能与DNA结合，也能与H1作用，可能与超螺旋结构有关。 DNA结合蛋白 可能是一些与DNA复制或转录有关的酶或调解物质。 A24非组蛋白 C端与H2A相同，功能不详;2. 真核生物基因组DNA;21;不重复序列 一个或几个拷贝，占DNA总量的40-80%，序列长约750-2000bp. 单拷贝基因也可以合成大量蛋白： 蚕丝心蛋白 DNA — 104 mRNA — 109 protein 中度重复序列 重复次数10-104，占DNA总量的10-40%，编码rRNA、tRNA和某些结构蛋白。 高度重复序列 卫星DNA(satellite DNA )，占基因组的10-60%，由6-100个碱基组成，大多位于染色体着丝粒，功能不明，可能与染色体的稳定性有关。;卫星DNA(satellite DNA );3. 染色质和核小体 (Chromatin and nucleosomes);核小体(nucleosome)是一种串珠状结构，由核心颗粒和连结线DNA两部分组成，可描述如下： ①每个核小体单位包括约200bp的DNA、一个组蛋白核心和一个H1； ②由H2A、H2B、H3、H4各两分子形成八聚体，构成核心颗粒； ③DNA分子以左手螺旋缠绕在核心颗粒表面，每圈80bp，共1.75圈，约146bp，两端被H1锁合； ④相邻核心颗粒之间为一段60bp的连接线DNA。;Shorter linker DNA favor;用小球菌核酸酶(Micrococcus nuclease)消化染色质DNA;核小体单体被微球菌核酸酶处理后，随着时间延长，其降解产物(DNA片段)会逐渐缩短，从200bp降至146bp，至此很难再进一步降解。 这种稳定结构为核心颗粒，它是由146bp的DNA片段和H2A、H2B、H3和H4各2分子组成。;从DNA到染色体;染色体结构的矛盾及协调;Certain staining techniques cause the chromosomes to have the appearance of a series of striations, which are called G-bands. The bands are lower in G-C content than the interbands. Genes are concentrated in the G-C-rich interbands.;果蝇(Drosophila)染色体结构图 通过染色体形态，可以研究基因缺失、重复和倒置。;Photo courtesy of José Bonner, Indiana University;真核生物基因组的结构特点 基因组庞大 存在大量重复序列 大部分为非编码序列（90%） 转录产物为单顺反子(见下页解释) 真核基因是断裂