第20章重组dna技术.pptxVIP

第 二十 章重组DNA技术recombinant DNA technique 第 一 节 重组DNA技术的基本过程重组DNA技术：又称DNA克隆或基因克隆 应用酶学的方法，在体外将不同来源的特异基因或DNA片段插入病毒、质粒或其它载体分子，构建重组DNA分子，然后将重组DNA导入到合适的受体细胞中，使其在细胞中扩增和繁殖（称之为“克隆”），筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子。克隆(clone)：来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。克隆化(cloning)：获取这类同一的DNA分子群体、细胞群体或个体群体的过程，即无性繁殖。重组DNA(recombinant DNA,或嵌合DNA, chimera DNA)：采用克隆技术，把来自不同生物的外源DNA插入载体分子所形成的杂合DNA分子。重组DNA技术的基本过程 第二节 重组DNA技术中常用工具酶 一、 限制性核酸内切酶二、 DNA连接酶三、 DNA聚合酶四、 其它修饰酶 1. 限制性核酸内切酶(restriction endonuclease) —基因工程的手术刀 识别双链DNA中特异序列，该序列的特征为4-6个核苷酸的回文结构，并在识别序列内或附近特异切割DNA，产生黏性末端或平末端。功能： 根据需要在特定的位点精确切割双链DNA分子。分类：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ（基因工程技术中常用Ⅱ型）作用：与甲基化酶共