第十一章生物技术.pptVIP

第一节 转基因植物的检测 第二节 转基因植物的安全性评价;本章教学目的与要求;第一节、转基因植物的检测;一、外源基因整合状态检测;1. 引物的设计与合成;;3. 反应体系与循环参数;大家学习辛苦了，还是要坚持;转基因棉花再生植株的NPT-Ⅱ报告基因的PCR检测 M：1Kb的分子量标准；P：质粒；C：非转基因对照； 1-27：转化再生植株;5. PCR检测的特点： 检测迅速 灵敏度高，可以检测到纳克级外源DNA 操作方便，对DNA质量要求不高 不足之处在于假阳性偏高、不能提供整合位点的遗传信息;;;2. DNA纯度及浓度的检测： 琼脂糖凝胶电泳 0.8% 植物DNA呈现分子量较大的清晰条带 如果DNA 条带呈弥散状，表明降解 如果在小分子量区存在较亮的条带，说明含RNA 如果点样孔较亮，表明样品含杂质 紫外分光光度法： OD260/ OD260 =1.8 OD260/ OD260 1.8 含较多RNA OD260/ OD260 1.8 含较多的蛋白质及其它杂质;;4. 凝胶电泳分离各酶切片段 凝胶厚度 0.5cm以上 样品及上样量 含分子量质量标准DNA，阳性对照，阴性对照 低电压、长时间电泳 1V/CM 电泳16小时;;;;转基因棉花再生植株的Southern分子杂交图;二、外源基因表达的检测;Northern杂交──DNA和RNA分子之间的杂交 检测目的基因是否转录出mRNA的方法;（二）RT-PCR;利用凝胶成像分析仪对电泳结果进行拍照和结果记录； 观察胶上是否有预扩增的主要产物带。对比目的基因产物的电泳谱带分子量和谱带的特异性，确定和描述谱带特征。 ;Western immunoblot analysis of chitinase (chi) gene expression in leaf extract of transgenic cotton lines.;（四）、生化反应检测法;（五）、生物鉴定法;一、转基因植物的类型;转基因植物的贡献;抗除草剂作物;抗虫棉花;抗CMV病毒转基因番茄;二、转基因产品 ;转基因生物给人类创造了巨大的经济和社会效益的同时，也可能给人类带来极大的潜在或现实危害。 康奈尔大学斑蝶事件 加拿大“超级杂草”事件 墨西哥玉米事件 ;??? 1999年5月，康奈尔大学的一个研究组在《Nature》杂志上发表文章，声称转基因抗虫玉米的花粉飘到一种名叫马利筋的杂草上，用马利筋叶片饲喂美国大斑蝶，导致44％的幼虫死亡。斑蝶蝴蝶是北美一种珍稀濒危动物，所以在当时在全世界都引起了很大的反响。 事实上，这一实验结果在科学上没有说服力。因为试验是在实验室完成的，且没有提供使用花粉量的数据。 ??? 现在这个事件也有了科学的结论： ???; 有人认为，外源基因的导入可能会造就某种强势生物，从而破坏原有生物种群的动态平衡和生物多样性。 1995年，加拿大首次商业化种植了通过基因工程改造的转基因油菜。但在种植后的几年里，其农田便出现了对多种除草剂具有耐抗性的野草化的油菜植株，即超级杂草。如今，这种杂草化油菜在加拿大的草原农田里已非常普遍。因为一些转基因油菜籽在收获时掉落，留在了泥土中，来年它们又重新萌发。如果在这片田地上种下去的不是同一个物种，那么萌发出来的油菜就变成了一种不受欢迎的野草，而且这种能够同时抵御三种除草剂的野草化的油菜不但很难铲除，而且还会通过交叉传粉等方式，污染同类物种，使种质资源遭到破坏。 　　应当指出的是，“超级杂草”并不是一个科学术语，只是一个形象化的比喻，目前并没有证据证明已经有“超级杂草”存在。同时，基因漂流并不是从转基因作物开始，而是历来都有。如果没有基因漂流，就不会有进化，世界上也就不会有这么多钟的植物和现在的作物栽培品种。;;37;（一）、食物安全;39;（二）、生物安全; ;正是由于以上种种 忧虑，人们对转基 因食品充满了恐惧 和担心。;三、转基因食品安全性管理;对转基因食品安全性评价的目的： 1、提供科学决策的依据； 2、保障人类健康和环境安全； 3、回答公众疑问； 4、促进国际贸易； 5、促进生物技术的可持续发展。;（二）安全性评价的原则;（二）安全性评价的原则 1、实质等同性原则 在1996年FAO/WHO召开的第二次生物技术安全性评价专家咨询会议，将转基因植物、动物、微生物产生的食品分为三类： （1）转基因食品与现有的传统食品具有实质等同性； （2）除某些特定的差异外，与传统食品具有实质等同性； （3）与传统食品没有实质等同性。 实质等同性比较的主要内容有生物学特性的比较，对植物来说包括形态、生长、产量、抗病性及其他有