流式细胞仪仪检测凋亡与细胞周期等应用.pptVIP

流式细胞仪仪检测凋亡与细胞周期等应用.ppt

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式细胞术m Flow Cytometr 什么是流式细胞仪 ●流式细胞仪实物 BD-Calibu BD FACS Vantage 概述 1.发展历史 ■1934 Moldavan 1973 Steinkamp 2.定义:对在高速流动的鞘液包括下对特异荧 光标记的细胞、粒子进行分析和分选的技术 3.特点 ◆测量速度快,每秒钟能测数千个乃至上万个 细胞 ◆可进行多参数测量 ◆在分析的同时可把具有指定特征的细胞分离 出来,即分选技术。 4.应用范围 凡是能被荧光素标记的细胞或颗粒都可用流式细 胞仪检测 前提这种荧光素能被流式细胞仪所配置的激光光 源激发 在生物检测技术中流式细胞仪是不可多得的一机 多用的仪器 流式细胞仪的工作原理和基本结构 待测细胞以单个细胞的悬液,经特 异性荧光染料染色,放入样品管 吸入流动室。 流动室充满鞘液,作用:约束样品 在喷嘴中心,防止样品靠近喷孔 壁堵塞喷孔。细胞排成单列由喷 嘴中心喷出,形成细胞液柱。 液柱与激光束相交,细胞上的荧光染料被激发产生荧光 荧光信号变成电信号输出到计算机,软件分析。 “灬 激光 PMT 电子计算机 偏板 。」LoJ 收集器 基本结构 流动室和液流系统; 激光源和光学系统 ■光电管和检测系统; 计算机和分析系统。 流式细胞仪可检测到的细胞参数 ■非荧光信号 侧向散射光 颗粒度 光源 前向散射光 细胞大小 前向角散射光(FSC)细胞相对大小及其表面积 侧向角散射光(SSC)细胞颗粒度及细胞内细胞器的 相对复杂性 3嗜碱性粒细胞 6单核细胞 。) 9 血液涂片

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