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式细胞术m
Flow Cytometr
什么是流式细胞仪
●流式细胞仪实物
BD-Calibu
BD FACS Vantage
概述
1.发展历史
■1934 Moldavan
1973 Steinkamp
2.定义:对在高速流动的鞘液包括下对特异荧
光标记的细胞、粒子进行分析和分选的技术
3.特点
◆测量速度快,每秒钟能测数千个乃至上万个
细胞
◆可进行多参数测量
◆在分析的同时可把具有指定特征的细胞分离
出来,即分选技术。
4.应用范围
凡是能被荧光素标记的细胞或颗粒都可用流式细
胞仪检测
前提这种荧光素能被流式细胞仪所配置的激光光
源激发
在生物检测技术中流式细胞仪是不可多得的一机
多用的仪器
流式细胞仪的工作原理和基本结构
待测细胞以单个细胞的悬液,经特
异性荧光染料染色,放入样品管
吸入流动室。
流动室充满鞘液,作用:约束样品
在喷嘴中心,防止样品靠近喷孔
壁堵塞喷孔。细胞排成单列由喷
嘴中心喷出,形成细胞液柱。
液柱与激光束相交,细胞上的荧光染料被激发产生荧光
荧光信号变成电信号输出到计算机,软件分析。
“灬
激光
PMT
电子计算机
偏板
。」LoJ
收集器
基本结构
流动室和液流系统;
激光源和光学系统
■光电管和检测系统;
计算机和分析系统。
流式细胞仪可检测到的细胞参数
■非荧光信号
侧向散射光
颗粒度
光源
前向散射光
细胞大小
前向角散射光(FSC)细胞相对大小及其表面积
侧向角散射光(SSC)细胞颗粒度及细胞内细胞器的
相对复杂性
3嗜碱性粒细胞
6单核细胞
。)
9
血液涂片
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