细胞生物学课后题汇总.pptVIP

第三章细胞生物学的研究方法 练习 不定向选择题(0.5分题) 、用于活细胞观察的技术有(ABc) A相差显微镜技术B微分干涉显微镜技术c暗视野显微镜技术 2、可用(B)技术来研究质膜结构的不对称性? A荧光显微镜技术B冰冻断裂蚀刻技术C相差显微镜技术 3、假设你对重建生活细胞的有丝分裂过程中染色体的三维结构感兴趣, 你将选择哪种技术(C)? A冰冻断裂蚀刻技术B扫描电镜技术 c激光共焦点扫描显微镜技术 4、如果对生物大分子进行动态研究和追踪,你采用哪种技术?(AB) A放射自显影技术B荧光共振能量转移技术c超速离心技术 5、流式细胞仪可用于(ABcD) A细胞分选B蛋白质含量测定CDNA含量测定DRNA含量测定 、名词解释(1分/题) 1、单克隆抗体技术2、原位杂交技术 3、免疫荧光标记技术4、细胞融合 三、动物克隆过程中应用了哪些技术?(1.5分) 细胞拆合、细胞培养、显微操作技术  ◆膜蛋白在膜中位置测定 可以通过非通透性试剂对蛋白质进行标记或修饰实验进 行 根据右图各处理细胞的膜蛋 A B C 白sDS聚丙烯凝胶电泳的3 带型判断5种膜蛋白在膜中|2 的位置,用简图表示。 A)对照 4〓4 B)用不能透过细胞质膜的|5〓5 胰蛋白酶 处理完整的细胞 C)先提高细胞质膜的透性, 再用胰 蛋白酶处理透性细胞  上部 完整细胞 →加胰蛋自酶 对 外侧 CrAy a t 胰蛋白酶处理的完整细胞 内侧 胰蛋白酶处理的透性细胞 透性细胞尽 少加胰蛋白酶→∴,  2、细胞外基质( extracellular matrix,ECM): 指分布于细胞外空间,由细胞分泌的蛋白和多糖所构成的网络结构 动物细胞外基质的基本成分是、 和 。其中 能够 形成水性的胶状物,构成细胞外基质的基质; 和 成细胞外基质的骨架,赋予细胞外基质一定的强度和韧性; 构和 起粘着作用,促使细胞同细胞外基质结合。  2、细胞外基质( extracellular matrix,EcM): 指分布于细胞外空间,由细胞分泌的蛋白和多糖所构成的网络结构 ·动物细胞外基质的基本成分是胶原蛋自、弹性蛋自、蛋自聚糖、 纤连蛋自和层黏连蛋自。其中蛋白聚糖能够形成水性的胶状物, 构成细胞外基质的基质;胶原蛋自和弹性蛋自构成细胞外基质的骨 架,赋予细胞外基质一定的强度和韧性;纤连蛋白和层黏连蛋白起粘 着作用,促使细胞同细胞外基质结合。 brereton Proteoglycan  3、细胞识别( Cel I Recognition) 指细胞对同种或异种细胞、同源或异源细胞以及对自己和异己分子 的认识和鉴别。 4、细胞黏着( CeI Adhes ion) 指在细胞识别的基础上细胞发生聚集形成细胞团或组织的过程。 既可介导同亲型细胞黏着,又可介导异亲型细胞黏着的细胞黏着分子 是D A.钙黏蛋白B.整联蛋白C.选择素D.免疫球蛋白超家族 Cadherins  练习题: 1、假若你新发现一个新的细胞膜蛋白,通过序列分析提示为一个多次跨膜 蛋白。为了确定跨膜次数及其末端朝向,你在细胞内高表达了该蛋白 1)通过免疫荧光技术标记细胞,发现用抗N端抗体直接标记活细胞时,出现 膜上荧光,而用抗∂端抗体时却没有。用甲醇固定细胞(此时细胞膜被破 坏)后,则两种抗体都出现膜上荧光标记; 2)如果先将细胞膜分离纯化,然后用蛋白酶充分降解膜外部分,再经SDs PAGE和银染,发现有10条主带,其中3条在对照细胞(即仅转染了空质粒 载体的细胞)的相应细胞中也有; 3)如果先用蛋白酶处理,再分离细胞膜,则发现6条主带,对照样品有其中 的2条。从以上实验结果,试分析该多次跨膜蛋白的结构。 2、比较cAMP信号通路和磷脂酰肌醇信号通路的异同点。  答案:实验结果分析:(1)用抗N端抗体直接标记活细胞时,出现膜上荧光,而 用抗c端抗体时却没有岀现膜上荧光。说明所硏究的膜蛋白多态链的№端在胞 外,C端在胞内 (2)将细胞膜分离纯化,然后用蛋白酶充分降解膜外部分,再经 SDS和银 染,发现有10条主带,其中三条在对照细胞即仅转染了空质粒载体的细胞)的 相应样品中也有。说明所硏究膜蛋白极有可能昰7次跨膜的多肽链,另外的三 次跨膜结构是质粒载体自身核苷酸序列表达的。 (3如果先用蛋白处理,再分离细胞膜,发现了6条主带,而对照样品有其 中的两条。说明多肽链在胞内由四部分组成三个环状结构域+端部分),另外 的胞内结构区域是质粒载体自身核苷酸序列表达的 综上所述:所硏究的膜蛋白多肽链的N端在胞外,C端在胞内;多肽链是7 次跨膜形成的,在胞内