细胞重组和克隆技术21页.pptVIP

细胞重组与克隆技术  骑颗看看赛爱赛爱家 质用特殊的方法分离开来,或把细胞核 从细胞质中吸取出来,或用紫外线等把 细胞中的核杀死,然后再把同种或异种 的细胞核和细胞质重新组合起来,培育 新的细胞或新的生物个体 细胞重组:细胞融合技术与细胞核质分 离技术结合,在融合介质作用下,使胞 质体与完整细胞合并,重新构成胞质杂 种细胞的过程  8.1细胞重组 8.11胞质杂种 812微细胞核移植 □8.13核移植 8.14细胞重建  8.11胞质杂种 胞质体( cytoplast):除去细胞核后由膜包裹的无核 细胞,由细胞松弛素B处理后,经离心得到。 □1972年, Presco借助细胞松弛素的和高速离心得到 核体( karyoplast):由胞质体分离出来的核,带有少 量胞质并围有质膜的结构。 胞质杂种细胞:将胞质体和另一完整细胞融合得到的 细胞。 杂种细胞:核体与完整细胞融合。 口重组细胞:核体与另一种细胞的胞质体融合。  彐1、2、3亲本细胞 4、6核体 5、7胞质体 8、9杂种细胞 10重组细胞 围郾 彐11胞质杂种细胞 彐IPEG介导 Q③③HAT培养基筛选 11  鉴别与意义 利用双重标记法鉴别杂种细胞的真伪,可以采 用两个具有不同缺陷型的细胞作标志,或用3H 胸腺嘧啶核苷作核标记,并使其吞入不同颗 粒的乳胶作为胞质标志,或者用3H一亮氨酸等 标记氨基酸作为胞质标记,也可用红绿荧光的 聚乙烯颗粒标记重组细胞 意义:胞质杂种细胞是不同种系之间的一种真 正的新型细胞,在适宜的条件下能成功的生存 下去,它在物种的品种改良、医学及农业的各 个方面将产生重大的影响  8.12微细胞核移植 微细胞:只有一条或几条染色体和一薄 层细胞质,外面包裹一层完整的细胞质 膜的核质体。利用秋水仙素先将细胞阻 断在染色体中期,然后培养,再用细胞 松弛素B处理得到。以微细胞作供体, 通过与遗传性完整的受体细胞融合,可 以将微细胞内所含有的几条染色体转移 到受体细胞中去。  秋水仙胺 细胞杂种细胞的制作过程 供体细胞 秋水仙胺 细胞松驰素 微细胞 8ag 细胞松驰B e 核化细胞 融合 体细胞 择 微细胞异核体 微细胞朵种  口核移植起始于用微吸管对阿米巴等原生动物进 行的核操作。 口在1952年,美国人罗伯特布里格斯和T小金 首先利用两栖类卵细胞建立细胞核移植技术 由于两栖类的蛙卵数量较多,体积较大,容易 获得,操作方便。 口1958-1962年,英国剑桥大学的约翰格登教 授和麦金尼尔利用瓜蟾原肠内胚层细胞核移植 培育出可育的非洲瓜蟾。  网路速数可产 》蝌蚪 非洲爪蟾制 肠上皮细胞 物极袭 卵原核无活性 e 一安,高