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四川大学实验报告题目目的基因与载体的连接转化及工程菌导入表达并验证一实验目的学习目的基因连接转化载体的原理和方法学习制备感受态细胞并将质粒导入工程菌的原理和方法学习菌落鉴定阳性克隆的方法和步骤二实验原理的连接重组具有相同粘性末端的两段分子在连接酶的作用下可以连接在一起因为相同的粘性末端同一通过碱基互补配对形成一个相对稳定的结构连接温度的选择理论上的最适温度是连接酶的最适温度摄氏度但是该温度下粘性末端形成的配对结构稳定所以在室温下度既可最大限度发挥连接酶的活性又有助于短暂配对结构的稳定感受态细胞的
四川大学实验报告
题目:目的基因与载体的连接转化及工程菌导入表达并PCR验证。
一. 实验目的:
1. 学习目的基因连接转化载体的原理和方法。
2. 学习制备感受态细胞并将质粒导入工程菌的原理和方法。
3. 学习菌落PCR鉴定阳性克隆的方法和步骤
二. 实验原理
1. DNA的连接重组:
具有相同粘性末端的两段DNA分子在DNA连接酶的作用下可以连接在一起。因为相同的粘性末端同一通过碱基互补配对形成一个相对稳定的结构。连接温度的选择,理论上的最适温度是连接酶的最适温度---37摄氏度,但是该温度下粘性末端形成的配对结构稳定,所以在室温下(12~16度)既可最大限
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