发酵流程幻灯片.pptVIP

1 发酵工程简介 发酵工程的内容 发酵工程主要包括了 菌种的选育 、 培养基的 配制 、 灭菌 、 扩大培养和接种 、 发酵过程 和 产品的 分离提纯 等内容。 3 发 酵 工 程 的 流 程 从自然界分离的菌种 诱变育种 基因工程 细胞工程 生产用菌种 扩大培养 接种 发酵罐 发酵条件控制 原料 培养基 的配制 灭菌 微生物菌体 代谢产物 产品 1 ．菌种的选育 ： 发酵工程的内容 基因突变、基因工程、细胞工程 人们怎样才能得到优良的菌种呢？ 发酵工程是利用微生物为人类生产有用产 品，因此要想通过发酵工程获得在种类、产量 和质量等方面符合人们要求的产品，最重要的 是要有优良的菌种。 如果生产的是微生物直接合成的产物，如青霉素、 谷氨酸等，则可以从自然界中先分离出相应的菌种 ，再用物理或化学的方法使菌种产生突变，从突变 个体中筛选出符合生产要求的优良菌种。 例如：可将人工合成的人的胰岛素基因与大肠杆 菌的质粒结合，形成重组 DNA ，再把重组 DNA 导入大肠杆菌细胞内形成工程菌。通过筛选则可 培养出能生产人的胰岛素的菌种。 如果生产的是一般微生物不能合成的产品，则可用 基因工程 、 细胞工程 的方法对菌种的遗传特性进行 定向改造，以构建 工程细胞 或 工程菌 ，从而达到生 产相应产品的目的。 2 ．培养基的配制： 发酵工程的内容 要进行发酵生产，有了优良的菌种还需 要有与菌种相适应的培养基。在配制培养 基时应该注意哪些事情呢？ ⑴根据不同的菌种，应选择不同的材料配制 培养基。配制的培养基应 满足 微生物在碳源 、氮源、生长因子、水、无机盐等方面的 营 养要求 ，并为微生物 提供适宜的 pH 。 ⑵培养基的 营养要协调 ，以利于产物的合成 。 ⑶培养基在满足微生物的营养需求的基础上应 尽量 降低生产成本 ，以得到更高的经济效益。 例如：发酵生产常采用天然成分的液体培养 基。而且，经常用野生的植物淀粉、甘蔗渣 、秸秆水解物以及乙醇、醋酸等石化产品代 替粮食来配制培养基。 3 ．灭菌 ： 发酵工程所用的菌种大多是单一的纯种，整个 发酵过程中不能混入杂菌。 这是为什么呢？ 在发酵过程中如混入其他微生物，将与菌种形成竞 争关系，对发酵过程造成不良影响。 例如：如果在谷氨酸发酵过程中混入放线菌， 则放线菌分泌的抗生素就会使大量的谷氨酸棒状 杆菌死亡。如果在青霉素生产过程中污染了杂菌 ，这些杂菌则会分泌青霉素酶，将合成的青霉素 分解掉。 那如何防止杂菌的污染呢？ 要在发酵前对培养基和发酵设施进行严格 的灭菌处理。 怎样才算灭菌彻底呢？ 用 高温、高压 等方式，杀死所有杂菌的 胞体、芽孢和孢子。 4 ．扩大培养和接种 ： 工业发酵要想在较短的时间内得到大量的发 酵产物，这无疑需要大量的菌体。如何得到发 酵生产所需要的大量菌体来缩短生产周期呢？ 这就需要经过多次的扩大培养。 如何对菌种进行扩大培养呢？ 扩大培养是将培养到对数期的菌体分开， 分头进行培养，以促使菌体数量快速增加，能 在短时间里得到大量的菌体。 扩大培养与发酵生产过程中的培养有何不同呢？ 扩大培养 是为了让菌体在短时期内快速增 殖 ，而 发酵过程中的培养 是 为了获得代谢产物 ，目的不同采用的培养条件就有可能不同 。 例如：在酒精发酵过程中，扩大培养是为了促 使酵母菌快速增殖，因此是在有氧条件下进行 。而在发酵产生酒精的过程中则必须在无氧条 件下进行以获得大量的酒精。 有了用于生产的充足的菌体，在接种时 要注意什么事项呢？ 接种过程中要注意防止杂菌污染。 整个接种过程 必须无菌条件下操作 发酵过程 将菌体接种到装有培养液的发酵罐中，是 不是发酵生产就能顺利地进行呢？ 还需要对发酵过程进行检测和对发酵条件进行 控制。 这又是为什么呢？ 发酵产物主要在菌体生长的稳定期产生 。因此，要在发酵过程中随时取样检测培 养液中细菌数目、产物浓度以了解发酵进 程，及时添加必需的培养基成分来延长菌 体生长稳定期的时间，以得到更多的发酵 产物。同时，还应对发酵条件进行严格控 制。 哪些条件能影响菌体的发酵呢？ 结论：发酵生产中温度、 pH 、溶氧量等 对发酵过程有重大影响。 发酵过程中为什么还要控制发酵条件呢？ 因素 pH 氧 代 谢 途 经 NH 4 ＋ 谷氨酰氨或乙酰谷氨酰氨 谷氨酸 适量 不足 α— 酮戊二酸 谷氨酸 谷氨酰氨 适量 缺乏 过量 适量 乳酸或琥珀酸 谷氨酸 适量 不足 影响谷氨酸代谢途径的因素 发酵过程中氧的 溶量、 pH 、磷酸盐 等都能影响谷氨 酸代谢途径，从而影响代谢产物的合成。同时，随着 代谢的进行，产热的增加、某营养物质的消耗，以及 某些酸性和碱性物质的产生，会使温度、 pH 等发生 变化，这些都会对微生物的生长造成不利影响。因此 ，需要对发酵过程的中 温度、 pH