醋酸薄膜电泳的资料.pptVIP

实验三 血清蛋白质醋酸纤维 素薄膜电泳 (Cellulose acetate membrane electrophoresis of serum proteins 实验目的 掌握电泳法分离蛋白质的原理 2、熟悉醋酸纤维素薄膜电泳的操作、注意事项 3、熟悉测定血清中各种蛋白质相对百分含量 的方法 4、了解AG的临床意义 分高蛩白质的方法 沉淀法∫藏析法 有机溶剂沉淀法(离子交换层析 分离方法层析法 吸附层析 凝胶过滤(分子筛) 电泳法 电学法{等电聚焦 亲和层析 超速离心法 电泳 电泳 依据分子或颗粒所带电荷、形状、 大小等不同,因而在电场介质中移动 速度不同,从而达到分离的技术。 阴离子,向正极移动 H+ Pr Pr OH OH NH2 NH3 pHpl pH=pl pHpl 阳离子,向负极移动 电泳速度带电粒子在电场中运动时,单 位电场强度内粒子运动的速度,以U表示, 即 v Q X 6Tn V一粒子运动的速度 X一电场强度 Q一粒子所带电荷 r一粒子的半径 n一介质的粘度 、电泳的影响因素 ◆分离样品的性质 电泳介质的pH ◆缓冲液的离子强度 电场强度 电渗作用 电渗作用 在电场中液体对固体支持物的相对移动. 正极 负极 表面带负电荷 ++++++++ 带正电荷的水层携带粒子向负极移动 如果样品原本是移向负极的,则泳动的速度加快; 如果样品原本是移向正极的,则泳动的速度减慢。 、电泳的分类 纸电泳( Paper electrophorsis 支持介质不 醋酸纤维薄膜电泳( Cellulose acetate electrophoresis 琼脂凝胶电泳( Agar Gel electrophoresis) 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) SDs一聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS) 支持介质装置形式不同: (1)平板式电泳;(2)垂直板式电泳;(3)垂直柱式电泳 pH的连续性不同: 连续pH电泳非连续pH电泳