蛋白质磷酸化与非磷酸化.pptVIP

蛋白质磷酸化 蛋白质磷酸化与非磷酸化 非活性蛋白与活性蛋白的构象之间的转换是通过可逆共价修饰 调节蛋白质的方式，蛋白激酶则是这一过程催化磷酸化的重要蛋白， 而磷酸酯酶是去磷酸化的重要蛋白 . 已经发现在人体内有多达 2000 个左右的蛋白质激酶和 1000 个左 右的蛋白质磷酸酶基因。蛋白质的磷酸化是指由蛋白质激酶催化的 把 ATP 或 GTP 上γ位的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基上的过程， 其逆转过程是由蛋白质磷酸酶催化的，称为蛋白质脱磷酸 . 根据是否有调节物来分又可分成两大类： 信使依赖性蛋白质激酶（ messenger-dependent protein kinase ），包括胞内第二信使或调节因子依赖性蛋白激酶及激 素（生长因子）依赖性激酶两个亚类；非信使依赖型蛋白激酶。 蛋白激酶的催化作用： 调节酶磷酸化 (1) 磷酸化酶激酶 P — 激活 (2) 糖原合成酶 P — 失活 蛋白质磷酸化 (1) 核中组蛋白磷酸化 — 加速核酸的复制，转录。 (2) 核糖体蛋白质磷酸化 — 加速蛋白质合成通性。 (3) 使膜蛋白磷酸化 — 加速物质的转运。 蛋白质磷酸化在细胞信号转导中的作用 (1). 在胞内介导胞外信号时具有 专一应答特点 。与信号传递有关的 蛋白激酶类主要受控于 胞内信使，如 cAMP ， Ca2+ ， DG （二酰甘 油， diacyl glycerol ）等，这种共价修饰调节方式显然比变构调节 较少受胞内代谢产物的影响。 (2). 蛋白质的磷酸化与脱磷酸化控制了细胞内已有的酶 活性 。与 酶的重新合成及分解相比，该方式能对外界刺激做出 更迅速 的反应。 (3). 对外界信号具有 级联放大 作用； (4). 蛋白质的磷酸化与脱磷酸化保证了细胞对外界信号的 持续反应 。 被磷酸化的主要氨基酸残基：丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸。组氨 酸和赖氨酸残基也可能被磷酸化。 1 、 Ser/Thr 蛋白激酶 蛋白磷酸化是蛋白激酶将磷酸基因转移到特定底物蛋白上的共价修 饰过程，调控蛋白质的酶学活性或生物学功能，分为 : ① cAMP 依赖的 PK ② Ca 2+ / 磷脂依赖的 PK ③ Ca 2+ / （ CaM ）钙调蛋白依赖的 PK ④ cGMP 依赖的 PK ⑤近年发现新成员—— DNA 依赖的 PK ⑴ cAMP 依赖的蛋白激酶（ cAMP dependent protein kinase.PKA ） cAMP- 依赖蛋白激酶是一种四聚蛋白酶，含有两个调控亚基和两个催 化亚基。当 cAMP- 依赖蛋白激酶的调控亚基结合时，激酶解离成两个具有 催化活性的蛋白激酶（由催化亚基形成）和一个二聚的调控亚基。 cAMP- 依赖蛋白激酶被活化后，它解离出来的活性蛋白酶能够催化 ATP 分子与目标代谢酶分子的磷酸化反应。一般是代谢酶的 Ser 或 Thr 残基 的羟基被 ATP 磷酸化，其结果是代谢酶被抑制或激活。 cAMP 即是通过上述 机制实现对代谢酶活性的调控。 结构与功能 ? 2 个调节亚基（ R ） +2 个催化亚基（ C ）→PKA全酶复合体 （ R 2 C 2 ）（无 cAMP 时，无活性） ? cAMP 与特异 R 亚基结合→构象变化→成为 R 亚基二聚体 +2 个有活 性 C 亚基 , 各种哺乳动物细胞可不同水平表达 3 种 C 亚基亚型 (C α C β C γ ) 和 4 种 R 亚基亚型(RⅠ α RⅠ β RⅡ α RⅡ β ) →结 合成全酶PKA Ⅰ型和 Ⅱ型 . 2) Ca 2+ / 磷脂依赖的蛋白激酶（ Ca 2+ /phospholipid dependent protein kinase ） 经第二信使 Ca 2+ 、甘油二酯 DG 或磷脂酰丝氨酸刺激而激活的蛋白激酶称为 Ca2+ / 磷脂依赖的蛋白激酶，是肌醇磷脂信号传导通路的关键环节。 多种激活剂与质膜上特异受体结合→磷脂酶 C → 肌醇磷脂（ PIP 2 ） 水解 三磷酸肌醇（ IP3 ） + 甘油二酯（ DAG ） 生物效应 ←蛋白磷酸化 ← CaM ―PK ← Ca 2+ ↑←胞内 Ca 2+ 池 一系列细胞蛋白磷酸化 PKC 磷酸肌醇级联放大的细胞内信使是磷脂酰肌醇 -4 ， 5- 二磷酸（ PIP 2 ）的两个 酶解 产物：肌醇 1 ， 4 ， 5- 三磷酸（ IP 3 ）和二酰基甘油（ DAG ）。 C 激酶（ PKC ）是 依赖于 Ca 2+ 的蛋白质激酶。由于 IP 3 所引起的细胞质 Ca 2+ 浓度升高，导致 C 激酶从胞 质转运到靠原生质膜内侧处，并被 DAG 和 Ca 2+ 的双重影响所激活。 C 激酶的活性也受磷脂酰丝氨酸的影响，原因是后者大大提高了 C 激酶对于 Ca 2+ 的亲和力