检验技术术化学发光与荧光免疫技术及仪器.pptVIP

第十一章 化学发光和荧光免疫技术及仪器 内容概述 第一节化学发光免疫分析技术 第二节电化学发光免疫分析 第三节时间分辨荧光免疫分析法 第四节荧光偏振免疫分析法 第五节化学发光免疫分析的临床应用 教学月标和要求 掌握化学发光免疫分析技术的基本原理、反应的 底物和标记方法以及反应类型 熟悉电化学发光免疫分析的基本原理和标记物, 时间分辨荧光免疫分析法的基本原理及其标记物和螯 物 了解荧光偏振免疫分析法的基本原理和技釆特点 化学发光免疫分析的临床应用 第一节化学发光免疫分析技术 ◆基本原理 ◆反应的底物 ◆标记方法 ◆反应类型 ◆相关仪器 基本原理 化学发光,是指伴随化学反应过程所产生的发光的 发射现象。某些物质在进行化学反应时,吸收了反应过 程中所产生的化学能,使反应物分子形成电子激发态, 当电子从激发态返回到稳定的基态时,多余的能量就以 光子的形式发射出来。这一现象称为化学发光 A+B→C*+D 产生化学发光反应的条件和过程 ◆化学发光与荧光的区别: 化学能光能 ◆化学发光反应的条件: 反应必须提供足够的激发能焓变(△B介于170~300kjm1-1之间, 才能在可见光范围观察到化学发光现象 吸收了化学能后于激发态的分子或原子,必须以光子形 当被激发的分子回到基态时,也以光子的形式释放能量 )化学发光效率 化学发光反应的发光效率(中c)又称为化学发光总能量的产生率 发肘光的付于:49 加反应的分子总数 c1取决于生成激发态产物分子的化学激发效率 (中c)和激发态产物分子的发射效率(φp) 一般化学发光反应,中c1值约为106 (三)强度与反应物质浓度之间的关系 化学发光反应所发出的光的强度 反应速度 反应物的浓度 (四)化学发光的反应类型 学发光间接化学发光 1.直接化学发光 化学反应释放的化学能激发的是反应产物分子 A+B→C*+D,C C +h 2.间接化学发光(敏化的化学发光) 在化学反应中,激发能传递到另一个未参加化学 反应的分子上,使该分子达到电子激发态,再由激发 态分子返回到基态时发光;或反应首先生成一种高能 量的中间体,此中间体再将能量转移给另一个未参加 化学反应的分子,使该分子达到电子激发态,再由激 发态分子跃迁回到基态时发光的过程 A+B-C+D,C*+ F-F*+E, FEF+ hy