维生素E含量测定方法.pdfVIP

. 高效液相色谱法对维生素 E 粉、 E 油含量的测定 色谱条件 18 色谱柱：采用 C 柱 ( 长 150 mm，内径 4.6mm，粒径 4-5 μm) 流动相：甲醇 ( 色谱醇 ) +水 ( 去离子水 ) 比例： (98 + 2 ) 流速： 1.2 ml/min 检测波长 :285 nm 柱温 : 25 ±2 ℃ 进样量： 20 μL 溶液制备 标准溶液的制备 ： 本实验室的标准品为液体油状物，因此用注射器抽取直接滴加到容量瓶中称量，把容 量瓶放在分析天平托盘上然后滴加，称取维生素 E 标准品约 0.1g( 准确至 0.0002), 置 50mL 棕色量瓶中 , 加甲醇适量溶解并稀释至刻度 , 摇匀。 绘制标准曲线 把制成 2.008 mg/mL 的溶液作为贮备液。分别准确移取 0.5 、 1.25 、2.5 、3.75 、5mL 至 10mL的棕色量瓶中 , 加甲醇稀释至刻度 , 摇匀；得到浓度分别为 0.1004 、0.251 、0.502 、0.753 、 1.004mg/ml 的五种溶液，分别经 0.45 μm 滤膜滤过 , 滤液作为标准溶液。 用 100 μL 的进样针分别从制备的不同浓度的标准溶液抽取 60 μL 溶液，注意不能带有气 泡，注入液相色谱仪 , 按色谱条件操作 , 从 0.1004 —— 1.004mg/ml 依次进样，记色谱峰面积 以标准品溶液浓度 (C) 为纵坐标 , 峰面积 (A) 为横坐标 , 按照外标法过 5 点绘制标准曲线。 样品溶液的制备： 维生素 E 粉样品溶液的制备 制备步骤为： 研磨→称量→水浴溶解→定容→过滤 1. 研磨 把试样 E粉倒入研钵中适量，用研磨棒轻度研磨至颜色有变化为止。 2. 称量 把称量纸放到分析天平上然后置零，把研磨好的试样用药匙转移到称量纸 上，称取维生素 E 粉约 1g( 约相当于维生素 E 0.5g ，准确至 0.0002g), 置 50mL棕 色量瓶中。 3. 水浴溶解 加甲醇适量 , 置超声波水浴器中助溶 20 min 。 4. 移取定容 冷却至室温 , 用甲醇稀释至刻度 , 充分摇匀，从制备好的溶液中移取 1mL 到 10mL的容量瓶中， 用甲醇稀释至刻度 , 充分摇匀 ; 再从制备好的 10mL容量瓶中的 溶液中移取 2.5mL 放置到 10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度 , 充分摇匀。 5. 过滤 把制备好的溶液经 0.45 μm 滤膜滤过 , 滤液作为样品溶液。 维生素 E油样品溶液的制备 用注射器直接抽取 E油样品滴加到放在分析天平上的容量瓶中，称维生素 E油样品约 20mg,( 准确至 0.0002), 置 50mL棕色容量瓶中 , 加甲醇适量溶解，置超声波水浴中助溶 10min, 冷却至室温 , 用甲醇稀释至刻度 , 充分摇匀；经 0.45 μm 滤膜滤过 , 滤液作为样品溶液。 测定步骤 用 100L 的进样针抽取 60 μL 的维生素 E 粉、 E 油的样品溶液 , 注入液相色谱仪，按色 谱条件操作 , 得到色谱峰面积 (A i ) ，每批次样品溶液做三个平行样，根据标准曲线上各点的 峰面积 (Ast ) ，用外标法计算。 ;.