分子生物学精第八章-2ppt精选课件.pptVIP

Contents; 细胞是生命活动的基本单位。细胞通过DNA的复制和细胞分裂将本身所固有的遗传信息由亲代传至子代，实现增殖繁衍。它们还不断地“感知”环境变化，并对其作出特定的应答。 细胞应答可以分为3个阶段： 外界信息的“感知”，即由细胞膜到细胞核内的信息传递, 染色质水平上的基因活性调控, 特定基因的表达，即从DNA→RNA→蛋白质的遗传信息传递过程。; 蛋白质的磷酸化与去磷酸化过程是生物体内普遍存在的信息传导调节方式，几乎涉及所有的生理及病理过程，如糖代谢、光合作用、细胞的生长发育、神经递质的合成与释放甚至癌变等等。;能与受体呈特异性结合的生物活性分子则称 配体(ligand)。;受体的分类： 目前已知受体种类达百余种。;;G蛋白的种类和结构： 已发现有40多种，结构相似，均为异源性三聚体，由α、β、γ亚基构成.; 细胞表面受体与配体分子的高亲和力特异性结合，能诱导受体蛋白构象变化，使胞外信号顺利通过质膜进入细胞内，或使受体发生寡聚化而被激活。 受体分子活化细胞功能的途径主要有两条： 一是受体本身或受体结合蛋白具有内源酪氨酸激酶活性，胞内信号通过酪氨酸激酶途径得到传递； 二是配体与细胞表面受体结合，通过G蛋白介异的效应系统产生介质，活化丝氨酸/苏氨酸或酪氨酸激酶，从而传递信号。;存在于细胞质膜上的受体，根据其结构和转换信号的方式又分为三大类：离子通道受体，G蛋白偶联受体和跨膜蛋白激酶受体。;;真核细胞主要跨膜信号传导途径;;蛋白质磷酸化和GTP结合蛋白参与的信号转导过程;依赖于cAMP的蛋白激酶称为A激酶（PKA），它能把ATP分子上的末端磷酸基团加到某个特定蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上。;受cAMP水平调控的A激酶 非活性状态的PKA全酶由4个亚基R2C2所组成，分子量约为150-170，调节亚基与cAMP相结合，引起构象变化并释放催化亚基，后者随即成为有催化活性的单体.; 不同细胞对cAMP信号途径的反应速度不同： ●在肌肉细胞1秒钟之内可启动糖原降解为葡糖1-磷酸（图），而抑制糖原的合成 。;; ●在某些分泌细胞中，需要几个小时，激活的PKA 进入细胞核，将CRE结合蛋白磷酸化，调节相关基因的表达。许多转录因子都可以通过cAMP介导的蛋白质磷酸化过程而被激活，因为这类基因的5’端大都拥有一个或数个cAMP应答元件（CRE）。 CRE（cAMP response element， cAMP应答元件）是DNA上的调节区域。 (TGACGTCA) ;cAMP信号与基因表达;cAMP信号与基因表达;Contents;1. 组蛋白的乙酰化及去乙酰化 1.1. 组蛋白的基本组成：组蛋白是组成核小体的基本成分，核小体是组成染色质的基本结构单元。;核小体是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体和由大约200bpDNA组成的。八聚体在中间，DNA分子盘绕在外，而H1则在核小体的外面。每个核小体只有一个H1。 核小体组成念珠状结构，有一条细丝连着一串直径为10nm的球状体。 ;1.2. 核心组蛋白的乙酰化与去乙酰化;1.3. 组蛋白乙酰基转移酶（HAT）;1.4. 组蛋白去乙酰化酶（HDAC）;2. 组蛋白的乙酰化及去乙酰化对基因表达的影响 p320 组蛋白乙酰化的状态与基因表达有关。组蛋白N端“尾巴”上赖氨酸残基的乙酰化中和了组蛋白尾巴的正电荷，降低了它与DNA的亲和性，导致核小体构象发生有利于转录调节蛋白与染色质相结合的变化，从和提高了基因转录的活性。 相反，组蛋白去乙酰化与基因活性的阻遏有关。;Contents;1. 激素对靶基因的影响 许多类固醇激素（如雌激素、孕激素、醛固酮、糖皮质激素和雄激素）以及一般代谢性激素（如胰岛素）的调控作用都是通过起始基因转录而实现的。;1. 激素对靶基因的影响 体内存在的许多糖皮质类激素应答基因都有一段大约20bp的顺式作用元件（激素应答元件，简称HRE），该序列具有类似增强子的作用，其活性受激素制约。; 固醇类激素的受体蛋白分子有相同的结构框架，包括保守性极高并位于分子中央的DNA结合区，位于C端的激素结合区和保守性较低的N端。 N端功能不详，但它的存在保证了转录的高效进行。;保守性极高DNA结合区，位于C端的激素结合区和保守性较低的N端。 图示 不同激素受体的DNA结合区;类固醇激素通过胞内受体调节生理过程;2. 热激蛋白诱导的基因表达 能与某个（类）专一蛋白因子结合，从而控制基因特异表达的DNA上游序列称为应答元件。应答元件主要有： 热激应答元件（HSE） 糖皮质应答元件（GRE） 金属应答元件（MRE） 应答元件与细胞内专一的转录因子相互作用，协调相关基因的转录。;2. 热激蛋白诱导的基因表达 许多生物在最适温度范围以上，能受热诱导合成一系列热休克蛋白（he