活性污泥聚集过程中胞外聚合物的构成及功能分析.pdfVIP

中文摘要 摘 要 活性污泥法作为成熟的污水处理技术之一，已经在污水处理领域应用了100 多 年。然而，与微生物低效聚集相关的问题，如污泥膨胀、固液分离不良等，仍然经 常出现在活性污泥法的应用当中。胞外聚合物（Extracellular Polymeric Substances ， EPS ）作为包裹在微生物细胞表面的高分子混合聚合物，对微生物的聚集过程影响 显著。对EPS 在活性污泥聚集过程中的构成及功能进行研究，将有助于改善微生 物的聚集性能，并为解决活性污泥法中微生物低效聚集的问题提供理论指导。 本研究以活性污泥为研究对象，先期建立一种产率较高、涵盖种类丰富的EPS 提取方法。基于该提取方法，对不同环境因素下污泥微生物的聚集性能及其 EPS 的构成变化进行探究，最终确立最佳聚集培养条件。进一步，在最佳聚集培养条件 下培养由活性污泥分散而来的微生物，在此过程中，深入研究不同构成种类的EPS 在活性污泥聚集过程中的作用及作用机制。通过实验与分析，获得结论如下： 活性污泥中EPS 的提取方法研究显示：EPS 可以分为溶解型EPS(Soluble EPS ， S-EPS ）、松散结合型EPS （Loosely Bound EPS, LB-EPS ）和紧密结合型EPS （Tightly Bound EPS,TB-EPS ）；紧密结合型EPS 又可进一步分为离子TB-EPS 与疏水TB- EPS 。EPS 的提取顺序确定为：S-EPS→LB-EPS→离子TB-EPS→疏水TB-EPS 。EPS 的提取方法具体如下：所有EPS 提取过程中用到的液相环境为含有1.5 M NaCl 的 磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffer saline ，PBS ）；S-EPS 通过5000 g、4 ℃离心10 min 获得；LB-EPS 的提取采用80 ℃水浴加热5 min 的方法；离子TB-EPS 的提取 则是通过先加入250 mg Na S·9H O/g VSS 在氮气氛围下、4 ℃、400 rpm 的条件下 2 2 振荡处理1 h，然后再加入170 mg NH F /g VSS 在600 rpm、4 ℃下搅拌处理1 h 4 实现；疏水TB-EPS 的提取方法是加入140 mg/g VSS 的十二烷基硫酸钠 （SDS ） 在 600 rpm、4 ℃下搅拌 45 min 。新方法较水浴加热、阳离子交换树脂（Cation Exchange Resin ，CER ）以及甲酰胺-NaOH 法具有更高的产率以及合理的细胞破损 程度，同时具备更丰富的EPS 种类，是一种优良的EPS 提取方法。 不同环境条件对污泥微生物的聚集影响研究表明：最佳的聚集环境条件为：以 3 柠檬酸三钠为碳源，有机负荷为2 kg COD /m ，氮源为氨氮，氨氮浓度为160 mg/L， 钙离子浓度为8 mM，培养时间12 h。在不利的生长环境下微生物往往倾向于聚集， 如生长进入指数生长末期、碳源为有毒或复杂碳源、碳或氮限制等，相比于基质的 类型，基质浓度对聚集的影响更大。环境因素的变化改变了EPS 的构成，而EPS 的构成变化与微生物聚集性能紧密相关。 EPS 在污泥聚集过程中的功能分析研究发现：S-EPS 与LB-EPS 通过静电斥力 I 重庆大学硕士学位论文 的形式对污泥聚集产生负面影响，这种负面影响与这两种EPS 中的高糖醛酸占比 及其蛋白二级结构中对聚集有利的结构占比较小有关。LB-EPS 具有更多的负电基 团，因而对污泥聚集的抑制作用高于S-EPS 。离子TB-EPS 在污泥的聚集过程起到 主要的促进作用，疏水TB-EPS 对污泥聚集具有较弱的促进作用。离子TB-EPS 作 - 为EPS 的主要构成形式，其大量存在的-OH 以及部分C=OO 基团提供了丰富充足 的阳离子结合位点；同时，离子TB-EPS 的多糖可能分