《细胞生物学》教学课件：11核糖体.pptVIP

* 幼红细胞及网织红细胞均处于合成血红蛋白的过程中，此时细胞质中充满多聚核糖体；随着细胞的逐渐成熟，这些成簇的多聚核糖体逐渐分散为单体。当完全成熟时，红细胞全被血红蛋白填充，核糖体逐渐从细胞中消失。细胞培养时，一些分化较低的肿瘤细胞和胚胎细胞，在其细胞质中充满多聚核糖体；而当细胞进入有丝分裂阶段，则出现多聚核糖体的解聚，蛋白质的合成也明显下降。 当豚鼠缺乏维生素C引起坏血病时，成纤维细胞中粗面内质网膜上的多聚核糖体解聚为单体，但不脱落下来。此时，外输性蛋白质合成减少；相反，在创伤愈合过程中的成纤维细胞，其粗面内质网膜上附着许多平行线状或螺旋状的多聚核糖体，表示蛋白质的合成增强。 动物四氯化碳中毒后，可引起肝细胞的损坏，引起粗面内质网膜上多聚核糖体的脱落，此时蛋白质的合成也减少。 * 二、rRNA的结合部位 核糖体上具有一系列与蛋白质合成有关的结合位点与催化位点。 核糖体中主要活性部位示意图 mRNA分子结合位点 蛋白质的起始合成首先需要mRNA与小亚基的结合。 原核中，核糖体与mRNA的结合位点位于16S rRNA的3’端，其准确识别的基础是细菌mRNA有一段特殊的Shine-Dalgarno序列（SD序列），位于起始密码子上游5~10bp处。SD序列能与核糖体小亚基16S rRNA的3’端序列互补结合。 真核生物没有SD序列，核糖体小亚基准确识别mRNA的基础主要依赖于mRNA 5’端的甲基化帽子结构。 进行蛋白质生物合成时，核糖体在mRNA上移动方向是5’-- 3’端。 与tRNA结合的部位包括： A位点、P位点和E位点 A位点：与新掺入的氨酰tRNA结合的位点--氨酰tRNA结合位点或氨酰基位点，又称受位（acceptor site），它是根据mRNA分子上的信息，携带所需氨基酰tRNA所在的部位。 P位点：与延伸中的肽酰tRNA结合的位点--肽酰tRNA结合位点或肽酰基位点，又称给位（donor site），它是延伸中多肽酰基所在部位。 E位点：大亚基长除了有P位点，还有一个出口部位，即脱氨酰tRNA的离开A位点到完全释放的一个位点，称为E位点。新形成的蛋白质由这个出口伸到外面。 与肽酰tRNA从A位点转移到P位点有关的转移酶的结合位点。 肽酰转移酶的催化位点 目前认为在核糖体中，rRNA是起主要作用的结构成分，其主要功能是： 具有肽酰转移酶活性 为tRNA提供结合位点（A位点、P位点和E位点） 为多种蛋白质合成因子提供结合位点 在蛋白质合成起始时参与同mRNA选择性地结合以及在肽链的延伸中与mRNA结合 r蛋白在多肽翻译过程中发挥重要的作用。 对rRNA折叠成有功能的三维结构是十分重要的 在蛋白质合成中，r蛋白对核糖体空间构像的改变起调节作用 第四节 核糖体的解离及自我组装 原核细胞核糖体70S 大亚基50S+小亚基30S 真核细胞核糖体80S 大亚基60S+小亚基40S 核糖体的大小亚基之间可因环境条件及生理状态的改变而发生聚合与解离。其中Mg2+对大小亚基的聚合和解离有较大影响。 实验表明，当Mg2+浓度为1~10mmol/L时，能促进大小亚基的聚合。 Mg2+浓度小于1mmol/L时，单个核糖体解离为大、小亚基； Mg2+浓度大于10mmol/L时，两个单核糖体结合成二聚体。 原核细胞的核糖体二聚体为100S 真核细胞的核糖体二聚体为120S 核糖体的蛋白质可以从核糖体上解离下来，也可以加回去而重新组装成有活性的核糖体。 利用16S rRNA和21种蛋白质在体外能重新组装成30S小亚基，并具有活性，这种组装称之为整体重组。 50S大亚基的整体组装需要分成两步。 23S 5 S 21种蛋白质 4mM Mg2+ 核糖体中间体 20mM Mg2+ 50S 大亚基 研究表明，核糖体是一种自组装的结构。在没有模板或亲体结构的情况下，可以由提纯的rRNA分子和分离的蛋白质重新装配成有功能的核糖体大小亚基。 第五节 核糖体与蛋白质的生物合成 一、多核糖体 核糖体在细胞内并不是单独地执行功能，而是由多个甚至几十个核糖体串联在一条mRNA分子上高效地进行肽链的合成。这种具有特殊功能与形态结构的核糖体与mRNA的聚合体称为多核糖体（polyribosome）。 每种多核糖体所包含的核糖体数量是由mRNA的长度来决定的。mRNA越长，合成的多肽相对分子质量越大，核糖体的数目也越多。 真核细胞中每个核糖体每秒能将两个氨基酸残基加到多肽链上，而在细菌细胞中每秒可将20个氨基酸加到多肽链上，因此，合成一条完整多肽链平均需要20s至几分钟。 原核细胞中，在mRNA合成的同时，核糖体就结合到mRNA上，即DNA转录成mRNA和mRNA翻译成蛋白质这两个生命活动是同时并几乎在同一部位进行的